禽流感病毒变异的分子机制重点分析.docVIP

禽流感病毒变异的分子机制 摘要：禽流感Avian Influenza，AI)是由正粘病毒科A型流感病毒引起的全身性或呼吸器官性传染病，国际兽疫局把该病定为A类烈性传染病。 关键词：禽流感病毒，血凝素，神经氨酸酶，变异，分子机制 1 AIV基因组及其编码蛋白 1.1 AIV基因组 AIV基因组为单股负链RNA，共有8个独立的RNA节段。通过对某些毒株8个节段的测序，发现它们存在一些共同的特点，即所有基因节段的5＇端前13个核苷酸均相同，3＇端也有12个高度保守的核苷酸。另外在每一节段靠近5＇端15～21位核苷酸处有一保守区。其序列为Poly U。这一序列可以在病毒mRNA合成时产生Poly A。 1.2 AIV的结构蛋白 AIV粒子的结构蛋白共有10种，由8个基因组片段编码，分别为： HA、NA、NP、M1、M2、NS1、NS2、PB1、PB2、PA。它们分别构成病毒基因组复制所需要的酶类和感染细胞时吸附受体的纤突以及维持病毒形态的基质膜等，分别阐述如下：①血凝素(HA) 是构成病毒囊膜纤突的主要成分之一，是典型的1型糖蛋白，在病毒吸附及穿膜过程中以及决定病毒致病力方面均起关键作用，可刺激机体产生中和抗体，是禽流感病毒中最为重要的保护性抗原；还可以刺激机体产生细胞毒性T淋巴细胞（CTL）反应。此外，HA 在决定病毒的宿主特异性方面也有重要作用。②神经氨酸酶( NA)是构成病毒囊膜纤突的另一个重要蛋白成分，属于2 类糖蛋白( 氨基端在囊膜内, 羧基端在囊膜外)。NA不仅在流感病毒复制过程中发挥重要作用, 而且其活性位点在甲型流感病毒上具有高度保守性。因此目前正在研制的许多新型抗流感病毒药物均以NA 为药物效应的靶点。③核蛋白( NP)是一种单体磷酸化的多肽是构成病毒核衣壳的主要蛋白成分与3种聚合酶蛋白( PB1、PB2、PA) 和基因组RNA 一起构成核壳体蛋白(RNP)。NP具有特异性, 是流感病毒划分A、B、C 型的主要依据, 在病毒基因组的转录和复制以及决定宿主特异性等方面都有重要作用。④⑤非结构蛋白（NS1、NS2）是A 型流感病毒的两种非结构蛋白，NS1参与病毒复制过程，在早期感染中NS1合成并在细胞核内积聚。NS2主要在晚期感染中出现，并主要在胞浆中存在。NS2 具体功能不详，尚待以后的深入研究。⑥聚合酶蛋白( PB1、PB2、PA) 在基因组成和功能上各不相同：PB1由片段2 编码，是在病毒mRNA 合成起始后使之逐渐延长；PB2 由片段1编码，是在病毒mRNA 转录的起始阶段识别并结合在5＇端Ⅰ型⑦其他蛋白（HE、M3、NB）由基因片段7编码，确切的功能还不清楚[3]。 2 AIV变异的研究进展 AIV在长期进化过程中获得了能很快适应环境的各种变异，主要包括抗原性变异、变异、耐药性变异、形状变异及对理化因素抵抗力的变异等，其中抗原性变异机制有4种，即抗原漂移、抗原转变、缺损颗粒干扰和RNA重组[4,5]。 2.1 抗原性变异 的抗原性变异主要是指病毒表面HA和NA的抗原性变异，尤其是HA变异，故而HA抗原特性及结构的改变与A抗原性变异密切相关，其机理涉及分子水平的抗原漂移和抗原转变缺损颗粒干扰和RNA重组。 抗原漂移(Antigen drift)是基因组自发点突变引起的小幅度变异，导致氨基酸改变积累到一定程度或突变氨基酸上正好使抗原决定簇改变，从而引起抗原性变异。由于RNA依赖的RNA聚合酶缺乏矫正功能，出错率较高，因此RNA病毒的突变率比DNA病毒高。在A型流感病毒中，抗原漂移是由血凝素和(或)神经氨酸酶基因发生点突变引起的，其中血凝素基因的变异率最高，每个核苷酸在每个复制周期中的变异率可高达2×10-3。影响抗原漂移的内因还有核苷酸序列丢失或插入造成的点突变，病毒含有的8个不同节段可能会因细胞酶促活性造成核苷酸断裂，然后在连接酶作用下重新连接，从而引起变异。引起抗原性变异的外因主要是免疫压力和气候异常。王泽霖等[6]对1998-2002年间5株河南地方分离株(H9N2)进行了抗原漂变的研究，发现与早期抗原相比，所有的变化都发生在HA蛋白的抗原表位的氨基酸，表现出了抗原漂移。 2.1.2 抗原转变 抗原转变(Antigen shift)是突变幅度较大导致产生的新亚型。造成抗原转变的原因主要有：①不同亚型病毒同时感染同一宿主细胞时，病毒基因组可发生节段变换。AIV在不同个体、不同品种之间可相互传播，且同一群禽类中，往往同时存在两种以上的亚型感染，即双重感染或多重感染。在重组病毒中含有的基因可以决定人的感染性的禽流感病毒HA糖蛋白，后者对大多数人群无免疫力[7]。②通过中间宿主产生来自不同宿主的流感病毒，在同一宿主体内产生新亚型，如猪被认为是禽流感病毒和其他不同流感病毒的混合器，因为猪细胞同时具有禽流感病毒