【骄子之路】2017高考生物一轮复习 第十一单元 现代生物科技专题 专题37 基因工程-及其安全性（含生物武器）课件（选修3）.pptVIP

栏目导航 基础自主复习 一、基因工程的概念及基本工具 2．基因工程的基本工具 (2)DNA连接酶 二、基因工程的基本操作程序 1．目的基因的获取 (1)目的基因：编码蛋白质的基因。 (2)获取方法：从基因文库中获取、利用?_______________扩增目的基因、利用?_______________人工合成。 2．基因表达载体的构建——基因工程的核心 (1)目的：使目的基因在受体细胞中?_____________，并可以遗传给下一代；使目的基因能够?_______________和发挥作用。 (2)基因表达载体的组成：目的基因、?_____________、终止子和标记基因等，如图。 名师提醒 (1)与载体相比较，增加启动子、目的基因和终止子三个基因片段，其功能各不相同。 (2)启动子(DNA片段)≠起始密码子(RNA)；终止子(DNA片段)≠终止密码子(RNA)。 三、基因工程的应用 六、生物武器对人类的威胁 考点分类透析 1.基因工程的基本原理和理论基础概括(如下图) 2．与DNA分子相关的酶 (1)几种酶的比较 (2)限制酶与DNA连接酶的关系 ①限制酶不切割自身DNA的原因是：原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。 ②DNA连接酶起作用时不需要模板。 3．载体 (1)作用 ①作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞内。 ②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 (2)具备的条件 ①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制。 ②有多个限制酶切割位点，以便与外源基因连接。 ③具有特殊的标记基因，以便进行筛选。 (3)种类 ①质粒：一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，能够自我复制的很小的双链环状DNA分子。 ②λ噬菌体的衍生物。 ③动植物病毒。 名师提醒 (1)一般来说，天然载体往往不能满足人类的所有要求，因此人们根据不同的目的和需要，对某些天然的载体进行人工改造。 (2)限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外，这样才能保证标记基因的完整性，有利于对目的基因的检测。 (3)限制酶是一类酶，而不是一种酶。 (4)限制酶的成分为蛋白质，其作用的发挥需要适宜的理化条件，高温、强酸或强碱均易使之变性失活。 (5)为使目的基因与载体形成相同的DNA片段末端以便连接，通常使用同一种限制酶将二者切割，但如果不同的限制酶切割DNA分子所产生的末端也存在互补关系时，则两末端也可连接。 (6)将一个基因从DNA分子上切割下来，需要切两处，同时产生4个黏性末端。 (7)不同DNA分子用同一种限制酶切割产生的黏性末端都相同，同一个DNA分子用不同的限制酶切割，产生的黏性末端一般不相同。 (8)限制酶切割载体的切割位点并不是任意的，必须保证至少有1个标记基因的完整性，以便于检测。 (9)基因工程中的载体与细胞膜上物质运输的载体不同。基因工程中的载体是DNA分子，能将目的基因导入受体细胞内；膜载体是蛋白质，与细胞膜的通透性有关。 (10)基因工程中有3种工具，但工具酶只有2种。 1.目的基因的获取途径 (1)从基因文库中获取，包括基因组文库和cDNA文库等。 (2)人工合成目的基因的常用方法 ①化学合成法：已知核苷酸序列的较小基因，直接利用DNA合成仪用化学方法合成，不需要模板。 ②反转录法：以RNA为模板，在逆转录酶作用下人工合成。 (3)通过PCR技术扩增目的基因，即通过指数式扩增获取大量的目的基因。 2．基因表达载体的构建 名师提醒 (1)该过程把三种工具(两种工具酶、一种载体)全用上了，是最核心、最关键的一步，在体外进行。 (2)农杆菌转化法原理：农杆菌易感染植物细胞，并将其Ti质粒上的T-DNA转移并整合到受体细胞染色体DNA上。 (3)目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化。转化的实质是目的基因整合到受体细胞染色体基因组中。 (4)标记基因的种类和作用：标记基因的作用——筛选、检测目的基因是否导入受体细胞，常见的有抗生素抗性基因、发光基因(表达产物为带颜色的物质)等。 (5)受体细胞的选择：受体细胞常用植物受精卵或体细胞(经组织培养)、动物受精卵(一般不用体细胞)、微生物(大肠杆菌、酵母菌)等。要合成糖蛋白、有生物活性的胰岛素则必须用真核生物酵母菌(需内质网、高尔基体的加工、分泌)；一般不用支原体，原因是它营寄生生活；一定不能用哺乳动物成熟的红细胞，原因是它无细胞核，不能合成蛋白质。 3．将目的基因导入受体细胞 (1)目的：目的基因进入受体细胞内并在受体细胞内维持稳定和表达。 (2)受体细胞种类不同，导入方法不同 4.目的基因的检测与鉴定 名师提醒 (1)只有第三步“将目的基因导入受体细胞”没有发生碱基互补配对，其余三步中都涉及碱基互补配对。 (2)切割目