性染色质：人体X-染色质观察.pptVIP

* * * * * * * * * */20 遗传学实验 实验01　　植物染色体常规压片技术及核型分析 实验02　　减数分裂与配子形成 实验一　　果蝇的形态、生活周期及其饲养 实验二　　遗传学中的人类味觉研究 实验三　　果蝇唾腺染色体标本的制备和观察 实验四　　性染色质：人体X-染色质观察 实验五 果蝇的单因子杂交实验 实验六 果蝇的伴性遗传 实验七　　实验五的检验 实验八　　实验六的检验 实验九　　植物有性杂交技术 实验十 人工诱发多倍体植物 实验十一 诱变物质的微核测试 实验十二 简易法提取植物总DNA 性染色质：人体X-染色质观察 一、实验目的： 通过实验掌握鉴定人类x染色质的方法，在显微镜下正确识别Barr小体的特征及其所在的位置。 了解X染色体失活的有关理论假说及失活染色体上的基因所控制的遗传性状的特点。 了解“剂量补偿效应” 的有关内容； 性染色质：人体X-染色质观察 二、实验原理： 在雌性个体的细胞中的2条染色体，在间期，有一条呈松散状态，参加细胞生理活动；另一条保持异固缩状态，我们称之为Barr小体。 由于Barr小体是处于失活状态，所以一般位于细胞核内边缘。形状多样（微凸形、三角形、卵形、短棒形等）。 性染色质：人体X-染色质观察 二、实验原理： 一般，在正常女性细胞中可能出现一个Barr小体，正常男性细胞中不可能出现Barr小体；（正常女性口腔粘膜细胞中约30－50%有一个Barr小体。在不同实验室中计数的差别较大，而在男性中则仅只偶尔可见不典型者——这是环境引起代谢的暂时现象，约2%以下）。对于性染色体畸变的个体。 Barr小体数 = 细胞内X染色体数 – 1 。 性染色质：人体X-染色质观察 二、实验原理： Barr小体特征及位置：它是处于失活状态的X染色体，一般位于细胞核膜内侧边缘的一个深染区（较细胞核要小），形状多样。 剂量补偿效应：是指XY型性别决定的生物，由X染色体上的基因决定的性状在两性的表现几乎相同。即X染色体上的基因的表达产物在雌、雄细胞中是等量的。补偿的实现途径：1、X染色体转录速率的差异性，雄性细胞中的X染色体转录速率＞雌性细胞中2条X染色体的转录速率；2、雌性细胞中有一条Ｘ染色体失活。 性染色质：人体X-染色质观察 二、实验原理： Ｘ染色体失活假说：在正常的雌性哺乳动物的体细胞中，一条Ｘ染色体在遗传上有活性，而另一条处于失活状态。这种失活发生在胚胎发育的早期，失活是随机的。 性染色质：人体X-染色质观察 三、实验材料 ： 上皮粘膜细胞、带有毛根的头发 性染色质：人体X-染色质观察 四、实验用具药品 1.仪器用具：显微镜、载玻片、盖玻片、剪刀、镊子、酒精灯、牙签 2.药品试剂：改良品红、醋酸洋红、50%醋酸、蒸馏水 性染色质：人体X-染色质观察 五、实验步骤： 口腔颊部粘膜细胞的观察 　　用牙签从女性口腔两侧颊部刮取上皮粘膜细胞，在原位刮取2-3次，分别涂抹在干净载片上，待稍干后，滴加1-2滴1%醋酸洋红染液，常温下染色2-5分钟，勿使干燥，压片后镜检。 要点：先漱口 性染色质：人体X-染色质观察 五、实验步骤： 2、毛发根部细胞的观察 　　拔取一根带有毛根的头发，在毛根部加一滴50%醋酸，低倍镜下观察。待毛根鞘软化后，拔去毛干，吸干醋酸，重新加一滴染液，盖片，在酒精灯上轻微加热后，静置5分钟，压片后镜检。（勿使干燥） 性染色质：人体X-染色质观察 五、实验步骤：X－染色质的辨认 低倍镜下检出典型的可数细胞： 标准：A、核质呈网状或细颗粒状分布；B、核膜清晰，核无缺损；C、染色适度；D、周围无杂菌； 高倍镜下观察：1、核膜内侧边缘；2、核仁附近；3、染色质中间游离部位。（正常女性口腔粘膜细胞中约30-50%有一个Barr小体。在不同实验室中计数的差别较大，而在男性中则仅只偶尔可见不典型者——这是环境引起代谢的暂时现象，约2%以下） 性染色质：人体X-染色质观察 六、关注点： 一般在一个可看到Barr小体的雌性个体的细胞核中，可能会存在多个深染区域，而只有在细胞核膜内侧边缘附近的一个较小的深染区域才可判断为Barr小体。 人体口腔内膜细胞形状多不规则。在压片时要注意尽量把细胞打散，以便于观察。 性染色质：人体X-染色质观察 性染色质：人体X-染色质观察 六、关注点： 证据：葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 　　葡萄糖-6磷酸脱氢酶（G-6PD）的活性在男女间没有区别。根据淀粉凝胶电脉的差异，可分为A型和B型。由X上一对等位基因GdA和GdB控制。只有一个氨基酸的差异。杂合体AB显示两条带。但从皮肤上取很小一片，用胰蛋白酶处理，使细胞分散，单独培养，发现，有的细胞群显示A型，有的显示B型，但没有显示两条带的。 X染色体数与Barr小体数 X染色体数与Barr小