【创新设计】2015-2016学年高中生物 专题二 细胞工程 第8课时 动物细胞融合与单克隆抗体学案 新人教版选修3.doc

第8课时　动物细胞融合与单克隆抗体 [目标导读]　1.掌握动物细胞融合的原理和方法。2.结合P53图2－24，归纳单克隆抗体的制备过程及应用。 [重难点击]　单克隆抗体的制备和应用。 1．将小鼠细胞和人体细胞融合成杂交细胞后，各自的表面蛋白质平均分配到膜表面(如图)，该实验说明了细胞膜具有一定的流动性。 2．抗体的化学本质是免疫球蛋白，是由浆细胞分泌的，能和抗原特异性的结合。 3．癌细胞在体外培养的条件下，只要提供合适的营养条件就能无限增殖。 [课堂导入] 我们知道，运用植物体细胞杂交技术，可以跨越植物种属间生殖隔离的屏障，培育出新的作物类型。那么能不能也利用这种技术来培育动物新品种呢？今天我们就来学习动物细胞融合及其应用。 探究点一　动物细胞融合 科学家经过长期的探索，也实现了让不同种动物的体细胞进行杂交。完善下图，回答问题。 1．动物细胞融合是指两个或者多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成的单核细胞，称为杂交细胞。 2．动物细胞融合的原理是什么？ 答案　细胞膜的流动性。 3．融合方法 (1)物理、化学方法：与植物体细胞杂交相同，如聚乙二醇、电激等。 (2)生物方法：灭活的病毒。 4．杂交细胞融合成功的标志是杂交细胞进行有丝分裂。 5．细胞融合技术与传统的有性杂交相比，其优越性在于克服远缘杂交的障碍。 归纳提炼 动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较 原理 方法步骤 诱导方法 结果 用途或意义 动物细胞融合 细胞膜具有流动性 分散成单个细胞后诱导细胞融合 物理方法 化学方法生物方法 形成杂交细胞培育杂交细胞或大量获得细胞产物　 植物体细胞杂交　　 ①细胞膜具有流动性 ②植物细胞具有全能性 酶解法去除细胞壁后诱导原生质体 融合，形成杂种细胞后培育成杂种植株 物理方法化学方法 形成杂种植株 克服远缘杂交不亲和的障碍 活学活用 1．如图所示为细胞融合技术的一些过程，据图回答下列问题。 (1)从A细胞和B细胞到C细胞的过程中，采用的方法中与诱导植物原生质体融合不同的是__________处理。 (2)若A、B细胞为单倍体烟草植物的体细胞，那么这样的细胞已经用酶降解脱掉了______________。这种酶可能是__________、__________，由此生成的细胞经培养形成的细胞团称为______________。 (3)若将基因型为AaBB的番茄细胞与基因型为AAbb的番茄细胞融合，由融合细胞培养成的愈伤组织细胞的基因型是__________。 (4)若将染色体组成为2A＋XX的人细胞与染色体组成为2B＋XX的鼠细胞融合，培育成的人－鼠细胞的染色体组成是______________。 答案　(1)用灭活的病毒处理　(2)细胞壁　纤维素酶　果胶酶　愈伤组织　(3)AAAaBBbb　(4)2A＋2B＋2X＋2X 解析　(1)动物细胞融合特有的方法是用灭活的病毒诱导融合。(2)植物细胞有细胞壁，若A、B细胞为单倍体烟草植物的体细胞，那么这样的细胞已经用纤维素酶和果胶酶脱掉了细胞壁；植物体细胞杂交获得的杂种细胞，经脱分化形成愈伤组织。(3)(4)细胞融合后的染色体或基因分别是两种细胞的染色体或基因累加。 探究点二　单克隆抗体的制备 动物细胞融合技术的最重要用途是单克隆抗体的制备，阅读教材并思考： 1．传统抗体的获得 (1)方法：①向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体；②从动物血清中分离所需抗体。 (2)特点：产量低、纯度低、特异性差。 2．单克隆抗体的制备原理 细胞 特点 B淋巴细胞 能产生单一抗体，但不能无限增殖 骨髓瘤细胞 能无限增殖，但不能产生抗体 融合细胞 既能产生抗体，又能无限增殖 3.单克隆抗体的制备过程 (1)制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原蛋白，然后从小鼠体内获得相应的B淋巴细胞。 (2)细胞融合：融合的方法常用聚乙二醇、灭活的病毒、电激等，这时得到的融合细胞除了杂交瘤细胞，还有B淋巴细胞相互融合的细胞和骨髓瘤细胞相互融合的细胞。 (3)筛选：用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞。这时候的杂交瘤细胞既能分泌抗体同时又能大量增殖。 (4)克隆化培养和抗体检测：从杂交瘤细胞群中选出能产生专一抗体的特异性杂交瘤细胞。 (5)培养杂交瘤细胞获得单克隆抗体：将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠的腹水中提取单克隆抗体。 4．由上述抗体的产生过程我们可将单克隆抗体的定义归纳为：由杂交瘤细胞大量繁殖所产生的、化学性质单一、高度特异性的抗体。 5．单克隆抗体的应用 (1)优点：特异性强、灵敏度高、产量大。 (2)应用 ①作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点。 ②用于治疗疾病和运载药物。 归纳提炼 单克隆抗体制备过程中的二次筛选 (