第三节酶的作用机理和酶的调节讲述.ppt

第三节 酶的作用机制和酶的调节 一、必需基团与活性中心 4. 研究酶活性中心的主要方法： 二、酶的作用机理 酶反应的独特性质： 与酶的高效率有关的因素： 1. 邻近与定向效应 邻近效应（proximity ） 指底物分子与酶活性中心的靠近。 2. 底物的形变(distortion) 3. 共价催化（covalent catalysis） 亲核催化 指酶分子中亲核基团对底物中亲电基团进行攻击。 4. 酸碱催化(acid-base catalysis) 狭义的酸碱催化（specific acid-base catalysis） 例：胰凝乳蛋白酶催化反应机制 5. 多元催化和协同效应 6. 活性中心是低介电环境 三、酶活性的调节控制 别构调节 可逆的共价修饰调控 酶原的激活 （一）别构调节（allosteric effect） 1. 别构酶的特点和性质 2. 别构酶举例 天冬氨酸转氨甲酰酶（ATCase） 3. 别构模型 齐变模型 （WMC） 序变模型（KNF） (二) 可逆的共价修饰调控 共价调节酶 （三）酶原的激活(proenzymes activation) 指无活性的酶原在一定条件下，去掉几个氨基酸或小肽而成为有活性的酶的过程。 Fig. 2-29 The catalytic triad (催化三联体)of chymotrypsin. ①酰化阶段: His57 从Ser195上吸收一个H+；Ser195的O-亲核攻击肽键羰基C原子; 肽键羧基部分与Ser195共价相连，肽键氨基部分以H键与His57相连（ES）。 （Asp102稳定His57正电荷形式） ES Fig.2-30 A detailed mechanism for the chymotrypsin reaction. 肽键断裂，肽键氨基部分从His57获得一个H+，氨基部分释放；肽键羧基部分与Ser195相连，形成酰基化酶。 ② 脱酰阶段：水分子攻击酰基化酶，His57 吸收一个H+，OH-攻击羰基C； His57供出一个H+给Ser195，释放C末端产物。酶恢复原状。 酰基化酶 胰蛋白酶 胰凝乳蛋白酶 弹性蛋白酶 241aa 240aa 223aa 丝氨酸蛋白酶家族具有相似的催化机制 Fig.2-31 Comparison of the amino acid sequences of chymotrypsinogen, trypsinogen, and elastase. Fig. 2-32 The substrate-binding pockets of trysin, chymotrypsin, and elastase. Ser189 Gly226 Gly216 Ser189 Thr226 Val216 Gly216 Gly226 碱性aa 芳香族aa 小的中性aa 选择裂解 在酶催化反应中，常常由几个催化反应配合在一起共同起作用。 羧肽酶A：邻近与定向；酸碱催化 溶菌酶：邻近与定向；底物形变；酸碱催化 胰凝乳蛋白酶：邻近与定向；共价催化；酸碱催化 酶的活性中心是一个非极性环境，可加强带电基团的静电作用，并使得底物分子敏感键和酶的催化基团有更大的反应力。 （1）寡聚酶 活性部位 别构部位 结合底物 结合底物外其它物质（效应剂） 通过改变酶分子构象而改变酶活力的调节。 别构酶 别构效应剂：引起别构效应的物质。 （2）具有别构效应 别构激活剂（正效应剂） 别构抑制剂（负效应剂） 凡是和酶分子结合使酶反应速度加快的物质。 凡是和酶分子结合使酶反应速度减慢的物质。一般为代谢反应序列的终产物。 通过调节别构酶的活力，可对代谢反应进行调节。 （3）别构酶的动力学：S 型曲线 [S] v Allosteric enzyme Nonregulatory enzyme Vmax 10% Vmax 90% Vmax Fig. 2-33 Effect of [S] on the velocity of two kinds of catalytic reaction. 非调节酶 [S] 90% Vmax 10% Vmax [S] = 81 [S] 90% Vmax 10% Vmax [S] = 3 别构酶 底物浓度只需增加3倍，就可使酶反应速度由10%Vmax 快速增加到90%Vmax。 S 型曲线表明当底物浓度发生微小变化时，酶反应速度可以快速增加，反应出别构酶可以灵敏地调节酶反应速度。 UMP CTP 氨甲酰磷酸 + Asp ATCase 氨甲酰天冬氨酸 Pi - ATP + 催化