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- 2016-11-28 发布于湖北
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9.解决方案 所制的胶不平 玻璃没有洗干净,应该要洗得非常干净。 过硫酸铵和TEMED的加量不合适,加量相对较多,凝胶凝固过快也会胶不平。 加完试剂以后没有很好的摇匀,导致有些部位的聚合剂浓度过高,聚合相对较快造成胶不平。 稍微注意手法,均匀加入。 灌胶后应该用水或者正丁醇压胶面。边缘胶是不容易聚合完全的,灌完胶后要立即加无水正丁醇覆盖,浓度越低的胶越不要使用双蒸水压。 胶凝时不可加热。 漏胶 每次电泳完后,洗净玻璃、胶条和其它附件。 避免玻璃边缘(与胶条接触处)的破损。 找一块很平的桌面制胶。 胶条一定要干,跑完电泳后,胶条就放在实验台上晾着。 可以在海绵垫下再垫一些纸,使得它与玻璃贴的更紧密。或者在玻璃底部涂抹凡士林封。 两块玻板完全对齐。 条带跑得比正常的窄 可能因为胶凝的不均匀,聚合的不是很好,灌胶的时候尽量混匀。 可能与拔梳子有关,拔梳应该迅速,均匀用力。 等指示剂跑到两层胶交界成一线时,再调整电压。 可能是样品的问题,如果盐浓度较高,便会挤压其它条带,致使条带宽窄不一,由于同样的原因,样品在凝胶中的速度会很慢,造成条带走的较慢。 每孔上样量不均匀,应确保每孔中上样量一致。 可能是系统的ph出了问题,有可能是电极缓冲液,也有可能是凝胶缓冲液,更新缓冲液。 “微笑” “微笑”是因为灌胶的时候冷却不均匀,中间部分冷却不好,导致凝胶中的分子有不同的迁移率所致。
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