基因突变和损伤DNA的修复资料.ppt

二、自发突变的机制 1.DNA分子的内部运动 A. 碱基脱氨或被甲基化，引起突变 B.互变异构效应 酮式与烯醇式的互变 2.缺失突变：除紫外线、X射线能引起外，可能与DNA在复制或修复中的差错有关。 3.自身代谢产物的诱变：硫氢化合物、过氧化氢等 4.环境因素引起的诱变 培养时间：2－7 d 适应性突变的分子机制？？？ 意义：在生物进化中有重要作用。 特别是对人体的肿瘤形成机理提供一些启示。 甲基化指导的 错配修复系统？ a-f为2-8d；a为自发突变；其余为适应性突变 突变的不良后果 体细胞突变 生殖细胞突变 癌变 致畸 衰老 配子死亡 死胎 自发流产 先天畸形 第五节 损伤DNA的修复 一.直接修复（Direct repair） (一) 通过DNA聚合酶校正修复 (二)光复活反应 光复活（photoreactivation）或光修复（light repair） 光裂合酶（photolyase),由phr 基因编码 烷基转移酶（Alkyltransferases） 光复活(photoreactivation) 1. 概念：在可见光存在的条件下，在光复活酶作用下将UV引起嘧啶二聚体分解为单体的过程。 2. 条件：可见光(300~600nm)、PR酶、嘧啶二聚体 3. 作用过程： ①光复活酶与T=T结合形成复合物; ②复合物吸收可见光切断T=T之间的C-C共价键,使二聚体变成单体; ③光复酶从DNA链解离. *光复活是原核生物中的一种主要修复形式。 切除修复(excixion-repair) —— 暗修复（dark repair） 短-补丁修复（short-patch repair） 长-补丁修复（long-patch repair） 例如：着色性干皮病（Xeroderma pigmentosum）是一种切除修复酶的缺陷 二． 切除修复（excixion-repair） (一) 一般切除修复 切除修复（暗修复） 人类DNA损伤的主要修复方式。 在E.coli中的切除修复系统 损伤：突变的碱基错配或改变DNA结构 剪切：内切酶在损伤碱基位点两侧剪切 切除：外切酶除去切口间的DNA 合成：DNA pol 合成取代DNA 连接酶封闭缺口 Uvr系统在修复各阶段中的作用： UvrAB识别损伤； UvrBC在DNA上切一缺口； UvrD使被标记区解旋 UvrABC核酸内切酶参与的核苷酸切除修复 参与UvrABC内切酶修复途径的基因 基因 基因产物的功能 uvrA uvrB uvrC uvrD DNA聚合酶I 连接酶 DNA结合蛋白 UvrA与UvrB结合后，再与DNA结合形成复合体；在损伤DNA的3‘末端造成切口； 与UvrB结合形成复合物，在损伤DNA的5’端造成切口 解旋酶II；帮助移去含有损伤的寡核苷酸 填充单链缺口 封合单链缺口 (二) 特殊切除修复途径 (1) AP核酸内切酶修复途径 （P54） AP位点 :无嘌呤（apurinic）和 无嘧啶（apyrimidinic）位点 N－糖基化酶修复途径 (2)GO系统 三、复制后修复 (一) 错配修复（mismatch repair） (1) 识别错配的碱基对； (2) 对错配的一对碱基要能准确区别哪一个 是错的，哪一个是对的； (3) 切除错误的碱基，并进行修复合成。 甲基化引导的错配修复系统，大肠杆菌的主要修复系统之一。 MutS MutL MutS 2个MutH dam基因编码Dam甲基化酶，使GATC/ CTAG序列中的A甲基化。MutS识别错配位点,并易位到GATC位点。MutH和MutL在GATC位点剪切非甲基化链，内切酶从GATC到错配位点降解DNA DNA聚合酶III Dam 基因编码Dam 甲基化酶，使GATC/CTAG序列中的A甲基化 新生链未甲基化；亲本链高度甲基化 据此可识别亲本和新生链 蛋白复合物 核酸外切酶降解切割链 (二)重组修复（recombination-repain） 复制→重组→合成→在连接酶的作用下，以磷酸二酯键使新片段与旧链相接完成修复过程。 特点：修复不彻底，但随着DNA的多次复制，损伤逐渐被“稀释”，使损伤的效应降低而近于正常。 P55 和图2-16 过程：RecA蛋白结合在有缺口的单链DNA上，并与完整双链的同源区配对形成三链区，由完整双链中的母链与带缺口的子链发生重组。子链中的缺口由母链填补，二母链中失去的部分则由DNA聚合酶和连接酶进行修复。