山苦瓜萃取物降血糖活性物质之筛选和初步分子.docVIP

山苦瓜萃取物降血糖活性物質之篩選及分子機制之Screening for hypoglycemic compounds in the extract of wild bitter melon and preliminary study of the molecular mechanism 研究生：曾心儀 Hsin-I Tseng 指導教授：鄭雪玲 Hsueh-Ling Cheng 【摘要】 胰島素抗性(insulin resistance)是促成第二型糖尿病type 2 diabetes)發病的主要因素。胰島素抗性是指原本對胰島素敏感的組織如肌肉，肝臟，脂肪組織對胰島素的敏感度降低，而減低了組織對葡萄糖的利用率，而造成高血糖的現象。因此若能治療胰島素抗性，將可以預防和改善第二型糖尿病。本實驗室過去已利用細胞株建立了一個篩選平台，可用以篩選「改善胰島素抗性」的活性物質，因此本研究亦利用此平台進行山苦瓜果實降血糖活性成分之篩選，並將篩選後認為有效的分液進行動物實驗以測驗其活體內的效果。以山苦瓜果實甲醇粗萃物進行細胞平台之葡萄糖吸收試驗，發現該甲醇粗萃物確能改善細胞的胰島素抗性而促進葡萄糖吸收。再將甲醇粗萃物進一步地分離成乙酸乙酯層、正丁醇層和水層，再進行葡萄糖吸收試驗，結果正丁醇層及水層皆能改善胰島素抗性細胞的葡萄糖吸收作用。再將正丁醇層進一步分成25個分液，發現分液7、12、16、19、21、23及24，仍恢復胰島素抗性細胞對葡萄糖吸收。其中分液16所含之天然物已進行純化，目前已獲得RA 2-10、RA 2-11及RA 2-19三個化合物。將此三個化合物進行分析，發現RA 2-19克服胰島素抗性活性最明顯。，發現RA 2-19活化AMPK)，暗示此天然物可能是經由活化AMPK而促進胰島素抗性細胞之葡萄糖吸收作用。再者，本研究亦發現RA 2-19可減少細胞之iNOS表現，但是RA2-19是否具有抗發炎的效果仍有待進一步驗證。此外，以分液15、21和23進行動物實驗，餵食具有高血糖症狀的小鼠，發現分液15於活體中降血糖效果不明顯，而分液21和23則有降血糖效果，值得進ㄧ步分析純化其成分，以分離出更多具有降血糖效果的天然物關鍵字：第二型糖尿病、胰島素抗性、 【Abstract】 Insulin resistance, the inability of insulin-responsive tissues mainly liver, muscles and adipose tissues to respond normally to circulating insulin, plays a key role in the development of type 2 diabetes. The reduced glucose utilzation by insulin-sensitive tissues results in hyperglycemia in organisms. Therefore, treatment of insulin resistance is an important strategy in preventing and improving type 2 diabetes. Previously, we have established a screening system using a mouse hepatic cell line to explore for compounds that can improve cellular insulin resistance. In this study, this system was used to screen for hypoglycemic compounds from the fruits of wild bitter melon. Meanwhile, animal tests were performed to test the in vivo effects of isolated fractions. The methanol extract from the fruits of wild bitter melon was shown to contain hypoglycemic compounds when tested using the screening system. The methanol extract was further partitioned into ethylacetate layer, butanol layer, and water layer. The butanol layer was fur