NY_T548-2015猪传染性胃肠炎诊断技术.docVIP

ICS 11.220B41 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 548—2015 代替 NY/T 548—2002 猪传染性胃肠炎诊断技术 Diagnostic techniques for transmissible gastroenteritis 2015-05-21 发布 2015-08-01 实施 中华人民共和国农业部发布 刖 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准代替NY/ T 548—2002《猪传染性胃肠炎诊断技术》。 本标准与NY/T 548—2002相比，病原检测部分增加了 RT- PCR检测方法。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC 181)归口。 本标准起草单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。 本标准主要起草人:冯力、陈建飞、时洪艳、张鑫 本标准的历次版本发布情况为： ——NY/T 548—2002。 猪传染性胃肠炎诊断技术 1范围 本标准规定了猪传染性胃肠炎的病原学检测和血清学检测。病原学检测包括病毒分离鉴定、直接 免疫荧光法、双抗体夹心酶联免疫吸附试验和反转录一聚合酶链式反应。血清学检测包括血清中和试 验和间接酶联免疫吸附试验。 本标准适用于对猪传染性胃肠炎的诊断、产地检疫及流行病学调查等。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和实验方法 GB 19489实验室生物安全通用要求 GB/T 27401实验室质量控制规范动物检疫 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 猪传染性胃肠炎^flns/nissiWe gasfroera￡eriris，TGE 猪传染性胃肠炎是由尼多目、冠状病毒科(Corowakriiae)、ot _冠状病毒属的猪传染 性胃肠炎病毒，TGEV)引起的猪的一种急性、高度接触传染性的肠 道疾病，以呕吐、水样腹泻、脱水和10日龄以内仔猪的高死亡率为主要特征。 4缩略语 下列缩略语适用于本文件。 CPE:cytopathic effect 细胞病变作用。 DIA： direct Immunofluorescence assay 直接免疫突光法。 ELISA： enzyme - linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附试验。 PBS: phosphate buffered saline 憐酸盐缓冲液。 PRCV: porcine respiratory corona virus 猪呼吸道冠状病毒。 TGE：transmissible gastroenteritis 猪传染性胃肠炎。 RT - PCR：reverse transcription - polymerase chain reaction 反转录一聚合酶链式反应。 5临床诊断 5. 1流行特点 TGE的发生和流行有暴发流行、地方流行和周期性地方流行3种形式。若感染了 TGEV的变异 株PRCV，则会出现不同的流行模式，从而使TGEV的流行更加复杂化。本病一年四季均可发生，一般 多发生在冬季和春季，有时也发生于夏季、秋季。各种年龄的猪均可感染，尤其是1〇日龄以内的哺乳仔 猪，发病率和死亡率可高达1〇〇%。病猪、带毒猪和隐性感染猪是本病的主要传染源。病毒通过粪一口 途径、气溶胶或感染母猪的乳汁进行传播。 5.2临床症状 本病的潜伏期较短，通常为18 h至3d。感染发生后，传播迅速，2d?3d可波及整个猪群。临床表 现因猪龄大小而异，新生仔猪的典型症状是呕吐、水样腹泻、脱水、体重迅速下降，导致新生仔猪高发病 率和高死亡率。腹泻严重的仔猪，常出现未消化的乳凝块。粪便腥臭，病程短，症状出现后2d?7 d死 亡。泌乳母猪发病，则一过性体温升高、呕吐、腹泻、厌食、无乳或泌乳量急剧减少，小猪得不到足够乳 汁，进一步加剧病情，营养严重失调，增加了小猪的病死率。3周龄仔猪、生长期猪和出栏期猪感染时仅 表现厌食，腹泻程度较轻，持续期相对较短，偶尔伴有呕吐，极少发生死亡。 3病理变化 TGEV引起的腹泻，尽管症状很严重，但是病理变化较轻微。肉眼可见的病理变化常局限于消化 道，特别是胃和小肠。胃膨胀，胃内充满凝乳块，胃黏膜充血或出血，胃大弯部黏膜淤血。小肠壁弛缓、 膨满，肠壁菲薄呈半透明。小肠内容物呈黄色、透明泡沫状的液体，含有凝乳块。空肠黏膜可见肠绒毛 萎缩，哺乳仔猪肠系膜淋巴管的乳糜管消失。 组织学变化主要以空肠为主，从胃至直肠呈广范围的渗出性卡他性炎症变化。其特征是肠绒毛萎 缩变短，回肠变化稍轻微。小肠变化有较明显的年龄特征，新生猪变化严重。电子显微镜观察