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516作坊发育生物学

浩瀚的宇宙之中唯有生命最神奇。每一个生命都有自己独特的一面,并且它们将它代代相传。这是为什么呢? 我们知道生命有机体要将遗传信息传递给子代,才能在子代中表现出独特的一面。但这个过程只进行DNA的复制是不够的,还必须进行遗传信息的转移,即转录。 一、转录是基因表达的中心环节 1. 转录是以 DNA为模板合成RNA, 并且只是以单股DNA 为模板,因此具有不对称性; 2. 用以转录的单链DNA, 称为模板链, 与复制不同,转录是局部的,从启动子开始到终止子结束,为一个转录单位; 3. 转录不需要引物; 4. 转录的忠实性相对弱; 5. 转录首先得到RNA前体,然后再进行加工转变为成熟的RNA. 生物基因的转录包括模板的识别、转录起始、延伸、终止等四个步骤。下面首先介绍RNA聚合酶的结构与功能以及启动子的结构特点,然后分别介绍上述四个步骤。 分子量48万,4种亚基: 全酶= 核心酶(α2ββ’)+ σ因子 α亚基决定转录的基因 β亚基在5’——3’方向上延长多核苷酸链,其方式与DNA 聚合酶相同,原料为NTP,没有纠错的功能。 β’亚基结合DNA模板 σ因子识别启动子并与之结合 大肠杆菌RNA聚合酶的结构与功能 聚合酶I :转录45S rRNA 聚合酶II:转录mRNA的前体,称为核不均 RNA(hnRNA) 聚合酶III:转录tRNA 和5S rRNA 等 DNA上的转录起始序列,称为启动子,有序列保守性,不仅是转录起始的位置,而且影响转录的活性。 1、转录开始 由σ因子辨认并且结合到启动子上,局部解链(10-20bp),拓朴酶等也参与。 2、RNA链的延伸 由核心酶催化,以其中的一股DNA 单链作为模板链,以NTP为原料,按照碱基互补配对的原则,通常是由5’ppp嘌呤核苷(G 或A )开头向着3’延长多核苷酸链,合成开始后,σ因子从模板上脱离下来(可以重复利用)。 核心酶覆盖双链DNA和RNA复合物,向前推进,一边解开螺旋,一边释放出新合成的RNA链,后面已经转录的区域中分开的DNA链又重新形成双螺旋。 A. 依赖ρ因子的终止 新生RNA上有ρ因子的识别位点。它与聚合酶-DNA-RNA复合物结合,向3’端移动,并解开DNA-RNA杂交体,需ATP。 B. 依赖于特定序列的终止 转录终止区有特殊结构。终止区的上游有GC二重对称区,转录的RNA容易形成多个“发卡”结构,转录产物的3’端有polyU序列。这种特殊的二级结构阻止了转录向下游继续推进。 转录得到的只是初级产物,通常要经过加工,才能转变为成熟的RNA。tRNA 和rRNA的转录后加工比较简单,而mRNA 的转录后加工比较复杂。 原核基因是多顺反子(poly-cistron),通常是几个相关的结构基因(编码的)同时转录得到多个mRNA。 而真核基因是单顺反子(mono-cistron),又是断裂基因。其结构基因中由编码的外显子(exon)和不编码的内含子(intron)间隔排开。转录得到的是“毛坯”,要在其5’端加上鸟嘌呤“帽子”,3’端加上polyA的“尾巴”,切除内含子,拼接外显子,才能成为一个成熟的mRNA。 * RNA的生物合成-转录 成员:张 满(0803108059) 张 俊(0803108058) 张 敏(0803108060)李兆丰(0703108053) 肖星星(0803108055) 牧医工程学院 08级动物检疫二班 转录(transcription): 以DNA为模板,在RNA聚合酶(RNA polymerase)的作用下合成mRNA,将遗传信息从DNA分子上转移到mRNA分子上,这一过程称为转录(transcription)。 被转录成单个RNA分子的一段DNA 称为一个转录单位(transcript) 二、 RNA聚合酶( RNA polymerase ) 1.原核的RNA聚合酶 与启动子结合,识别模板 σ因子 1 70000 rpoD σ 不详 核心酶 1 10000 w 与模板结合 核心酶 1 160000 rpoC β’ 与底物结合 核心酶 1 155000 rpoB β 酶的连接、装配 核心酶 2 40000 rpoA α 可能的功能 组分 数目 分

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