静态顶空技术剖析.ppt

静态顶空GC-MS法测定血浆中硫化氢 学号：2011310897 姓名：罗晓梅 （一）静态顶空技术 1、什么是顶空技术 ？ 顶空技术亦即气体萃取技术，常常用于气相色谱分析。 2、何为静态顶空技术 ？ 在一个密闭的容器中，其中的样品与样品上方的气体达到平衡，直接抽取样品上方气体进行测定的技术。 3、静态顶空分析步骤 （1）第一步：将液体样品或者固体样品放在一个密闭的玻璃样品中，并保持样品瓶中的样品上方留有一半以上的气体空间，在一恒定的温度下使两相达到平衡； (2) 第二步：样品瓶中的两相达平衡后，使用气密性注射器等份抽取样品瓶中的顶空气体，直接注射到色谱仪柱入口中，进行色谱分离与测定； 4、静态顶空气相色谱装置 5、顶空取样技术测定分类 （1）常规顶空分析技术 （2）全蒸发顶空分析技术：全蒸发顶空技术是把顶空样品容器(瓶)当作一个蒸发器而实现对样品中挥发性成分定量分析的一种技术 （3）化学反应型顶空分析技术：将原先气相色谱不能够测定的成分(非挥发性的)转化为挥发性的成分 ,从而实现用气相色谱对该非挥发性成分的间接测定的技术 （4）示踪剂顶空气相色谱技术：利用样品中被测成分对挥发性示踪剂的“排斥”或“吸附”作用 ,例如无机盐在溶液中的浓度会直接影响到溶液中挥发性组分的气液两相分配常数 ,即“盐析”效应 ,从而实现对非挥发成分的间接测定 （5）多次顶空抽提技术：多次顶空抽提与动态顶空气相抽提类似 ,但它是分步实现。 6、影响静态顶空分析的因素 （1）样品的性质：样品的性质对分析结果有直接影响 （2）样品量： 同样样品的体积增大，测定的灵敏度增加。但是，如果样品中的组成发生改变时，可能会对这一样品中的某些组分的灵敏度产生影响 （3）平衡温度：样品的平衡温度与蒸气压直接相关，它影响分配系数。一般来说，温度越高，蒸气压越高，顶空气体的浓度越高，分析灵敏度就越高 （4）平衡时间：平衡时间本质上取决于被测组分分子从样品基质到气相的扩散速度。扩散速度越快，即分子扩散系数越大，所需平衡时间越短 （二）、 GC/MS技术概括 气相色谱-质谱联用技术：供试品经GC分离为单一组分，按其不同的保留时间，与载气同时流出色谱柱，经过分子分离器接口，除去载气，保留组分进入MS仪离子源被离子化，样品组分转变为离子，经分析检测，记录为MS图。GC-MS中气相色谱仪相当于质谱仪进样系统，而质谱仪则是气相色谱的检测器，通过接口将二者有机地结合。 三、测定结果 硫化氢出峰时间参考值为3.6min，特征离子为34、32、33（见图1）。抽取特征离子34的面积，可对检材血中的硫化氢进行定量。 三、测定结果 GC/MS技术 血浆中硫化氢的测定 静态顶空技术 1:恒温液出口；2:注射器入口；3:恒温器；4:放置样品口；5:恒温液入口；6:样品 GC/MS的组成 content 一、实验原理 血浆中硫化氢测定步骤 硫化氢在人体中主要以硫化钠的形式存在 ，因此，对硫化氢的检验首先要在检材中加入适量的盐酸使硫化氢溢出，顶空法对液上气体进行GC或GD/MC分析。如公式所示：Na2S + 2HCl→ H2S↑ + 2NaCl 二、实验步骤 样品前处理 标准血样制备2 标准血样制备1 取心血3ml-5ml,置于20ml顶空瓶中,加入1g氯化钠,加3ml-5ml蒸馏水,加入2mol/L盐酸1ml加盖密封,混匀后于80℃水浴中加热20min. 取液上气体 0.5ml进样。 3-5ml空白新鲜血液,加入1g氯化钠,加3-5ml蒸馏水,加入2mol/L盐酸1ml加盖密封,其余同制备1。 配制1mol/L的Na2S溶液:称量 7.8gNa2S溶解在100ml蒸馏水中。 3-5ml空白新鲜血液,加Na2S溶液1ml,加入1g氯化钠,加 3-5ml蒸馏水,加入2mol/L盐酸1ml,加 盖 密 封,混 匀 后 于80℃水 浴 中 加 热20min。取液上气体0.2-0.5ml进样。