SDSPAGE电泳说课.ppt

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）分离血清蛋白 剥 胶 4 －将分离胶拨入培养皿 剥 胶3－切胶，拨开两侧，切去浓缩胶。 * 聚丙烯酰胺凝胶结构 十二烷基硫酸钠（SDS) 标准曲线 电泳槽安装－ 凹形玻璃、方形玻璃、密封胶条、样品梳 电泳槽安装－2 将密封胶条安放在方玻璃上 电泳槽安装－ 盖上凹玻璃 电泳槽安装－4 将两层玻璃一起放入制胶架，凹玻璃面向外。 电泳槽安装－5 插入楔子固定，平面接触玻璃将底部插紧。 如果跑单层板胶，把厚的替代玻璃装上。 部分用具与试剂 取液器的使用 灌入分离胶－ 用取液器沿凹形玻璃板上角将分离胶加到玻璃板夹层中 加入分离胶至玻璃板2/3处（约5ml) 灌入分离胶－ 灌入分离胶－ 分离胶上部加入少量水或正丁醇，去气泡，隔氧。 分离胶聚合－ 将制胶架放入25～30℃温箱，聚合约30min. 分离胶聚合后- 倒掉凝胶上部的水或正丁醇，并清洗胶面。 灌入浓缩胶－ 向夹层中加入浓缩胶至凹槽下沿，不能加水。  灌入浓缩胶－ 垂直插入样品梳（注意正反面）。 浓缩胶聚合－ 插好梳子 聚合后，拔出固定楔子，夹紧两层玻璃并取出。 浓缩胶聚合－ 用夹子夹紧玻璃，将封胶条轻轻撕掉。 旋转180°，将玻璃放进槽内(凹玻璃面向里)。 加缓冲液 加 样 电泳－连接电路（注意正负极），调整电泳仪, 开始电泳。 电 泳 剥 胶1－手持玻璃两端，轻轻撬开上层凹玻璃 剥 胶 2 *