第八章 发酵产物的分离提取.pptxVIP

第八章 发酵产物的分离提取;第一节 发酵产物分离的特点与过程设计;提取和精制 提取和精制是为了从发酵液中获得高纯度的、符合质量标淮要求的发酵成品。 发酵产物存在形式不同，用途各异，产品质量要求不同，分离纯化步骤有所不同。 但大多数包括以下四个步骤：发酵液预处理和菌体分离、提取、精制、成品加工。 ;二、常用的分离技术及机制;发酵产品后处理过程流程图 ;细胞破碎机理图;细胞破碎的阻力;破碎方式;细胞的破影响因素;高压匀浆法(High-pressure homogenization) ——大规模细胞破碎的常用方法;高压匀浆器;均质头的结构;均质头的结构;大多数均质机上配备双级均质阀，在第一级中，料液压力为19.6-25.4MPa, 主要使脂肪球破碎，第二级料液压力减为3.43MPa, 主要使脂肪球均匀分散。阀和阀座采用耐磨合金钢制造。三柱塞泵的特点是排液量比较均匀。 ;传动采用二级变速，利用曲臂镶入一对人字齿轮，实施对称传动，具有结构紧凑，弯矩小，受力均匀，平稳、低噪声等。;三柱塞泵 ;往复泵 ;压力 (工业生产中常用55～70MPa的压力) 循环操作次数(多次循环的操作方法) 温度 ;不宜采用高压匀浆法的微生物： ;进入珠磨机的细胞悬浮液与极细的玻璃小珠、石英砂、氧化铝等研磨剂（直径小于1mm）一起快速搅拌或研磨，研磨剂、珠子与细胞之间的互相剪切、碰撞，使细胞破碎，释放出内含物。在珠液分离器的协助下，珠子被滞留在破碎室内，浆液流出从而实现连续操作。破碎中产生的热量一般采用夹套冷却的方式带走。;原理：在搅拌桨的高速搅拌下微球高速运动，微球和微球之间以及微球和细胞之间发生冲击和研磨，使悬浮液中的细胞受到研磨剪切和撞击而破碎。产热由夹套带走。;②影响细胞破碎的因素;其原理可能与空穴现象引起的冲击波和剪切作用有关。;影响超生波破碎的因素;此法是将浓缩的菌体悬浮液冷却至-25℃形成冰晶体，利用500MPa以上的高压冲击，使冷冻细胞从高压阀小孔挤出，由于冰晶体的磨损，使包埋在冰中的微生物变形而破碎。该法主要用于实验室，具有使用范围广、破碎率高、细胞碎片粉碎程度低及活性保留率高等优点。不适用于对冷冻敏感的物质。;酶溶法;（1）酶溶法（Enzymatic Lysis）;选择性释放产物，条件温和，核酸泄出量少，细胞外形完整。;某些化学试剂，如有机溶剂、变性剂、表面活性剂、抗生素、金属螯合剂等，可以改变细胞壁或膜的通透性（渗透性），从而使胞内物质有选择地渗透出来。;如Triton X-100是一种非离子型清洁剂，对疏水性物质具有很强的亲和力，能结合并溶解磷脂，破坏内膜的磷脂双分子层，使某些胞内物质释放出来。 其他的表面活性剂，如牛黄胆酸钠、十二烷基磺酸钠、吐温等也可使细胞破碎。;处理G-细菌，对细胞外层膜有破坏作用。G-细菌的外层膜结构通常靠二价阳离子Ca2+或Mg2+结合脂多糖和蛋白质来维持，一旦EDTA将Ca2+或Mg2+螯合，大量的脂多糖分子将脱落，使细胞壁外层膜出现洞穴。这些区域由内层膜的磷脂来填补，从而导致内层膜通透性的增强。;能溶解细胞壁中的磷脂层，使细胞破坏。;通用性差； 时间长，效率低，一般胞内物质释放率不超过50% 有些化学试剂有毒 。;细胞破碎效果的检查 ;第三节 沉淀与离心;二、离心;2. 碟片式离心机;;碟式离心机分离原理;3. 沉降式螺旋卸料离心机;主要部件 ;;（三）离心过滤;;一、过滤 （一）过滤原理 （二）过滤介质 织物介质： 粒状介质： 多孔介质等;硅藻土;（三）过滤设备;真空过滤机;真空过滤机;分配头;工作原理;二、膜分离技术; 常见的膜分离过程有渗透、透析、电渗析、反渗透、微过滤、超滤、气体透过等。;;按动力本质分;膜分离技术的类型;膜的分类; 工业应用膜应具有的条件： 1. 较大的透过性； 2. 较高的选择性； 3. 机械强度好、耐热、化学性能稳定；4. 不被细菌污染;膜材料的种类; 按膜的结构可分为对称和非对称膜两大类，其中非对称膜还可细分为多孔膜、叠合膜以及复合膜等。;均质膜;铝膜;四、膜分离设备; （一）板式膜过滤器;适用范围: A、UF、MF， B、适合于处理高黏度及悬浮液较高的料液。 ;应用：A、毛细管式：UF、MF、PV，B、中空纤维式(能耐高压)：RO，DS(大规模透析，人工肾)，C、适合于处理低固体含量的料液。 ;（四）螺旋卷式膜分离器;螺旋卷式膜组件;卷式膜组件的特点;型式;6 膜分离装置;;六 膜技术的应用;膜的污染和清洗;超临界萃取( Supercritical Fluid Extraction ) ;1. 超临界流体的性质;CO2气体、液体和超临界流体的物理性质;SCCO2的其它优点：;2. 超临界萃取;;超临界状态下体系的特