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- 2016-12-02 发布于湖北
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第十七章:植物遗传转化;植物遗传转化 (plan genetic transformation): 应用重组DNA技术、细胞组织培养 技术或种质系统转化技术,有目的地将外源基因或DNA片段插入到受体植物基因组中并通过减数分裂获得新植株的技术。
;第一类:外源裸露基因的直接导入法;通过物理或化学的方法直接将外源目的基因导入植物基因组中。基因枪转化法
第二类:载体介导的转化方法;通过将目的基因连接在植物表达载体上,随着载体DNA的转移而将外源目的基因整合到植物基因组中。农杆菌介导转化法,病毒介导的转化法
第三类:种质转化系统法;包括植物原位真空渗入法和花粉管通道法。;(一)基因枪法;(1)原理:基因枪法把遗传物质或其他物质附着于高速微弹直接射入细胞、组织和细胞器。气体基因枪可在广泛的细胞型中得到瞬时的、稳定的和高效率的转化作用。气体基因枪有一个产生冲击波的特殊结构,在恰当的气压范围内从3.5MPa-10MPa,具有相应不同的可破裂膜,将包覆DNA的粒子穿越,射入在轰击室底部的靶细胞中。;(2)程序与方法:
①轰击微弹的制备② 基因枪轰击参数
③受体材料 ④ 轰击样品
;(3)基因枪法优缺点
基因枪法优点:①无宿主限制
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