动力学相关问题一(酶反应动力学)介绍.ppt

酶促反应可采用化学反应动力学方法建立动力学方程 假定整个酶反应体系处于动态平衡，即“拟稳态”， 即：ES的生成速率等于分解速率。 著名的米氏方程 竞争性动力学与无抑制动力学对比 非竞争性动力学与无抑制动力学对比 反竞争性动力学与无抑制动力学对比 底物竞争性动力学 竞争性抑制动力学 反竞争性抑制动力学 非竞争性抑制动力学 底物型抑制动力学 不可逆抑制动力学 主要学习以下抑制动力学 （a)竞争性抑制动力学 若反应体系中存在有与底物结构类似物的物质，该物质能在酶的活性部位上结合，从而阻碍了酶与底物的结合，使酶催化底物的反应速率下降。这种抑制成为竞争性抑制。 主要特点： 抑制剂与底物竞争酶的活性部位，当抑制剂与酶的活性部位结合之后，底物就不能再与酶结合。 E + I [EI] E +S [ES] P + E k1 k－1 k2 k3 k-3 E + I [EI] E +S [ES] P + E k1 k－1 k2 [E]t－酶的总浓度； [S]－底物浓度，通常[S][E]t [ES]－酶－底物络合物的浓度；[E]－游离的酶浓度； I－为抑制剂； [EI]－为非活性复合物 由假稳态得： 络合物ES的分解速率： k3 k-3 [E]t =[E]＋[ES]+[EI]； 经整理得到： （KI－为抑制剂的解离常数；Km*－有抑制剂存在时的表观米氏常数） 竞争性动力学常数Km*、KI与Vmax的求取：作图法 斜率＝Km/KI Km* [ I ] -KI Km * * KI值越小，表明抑制剂与酶结合越强，抑制作用越大。 （b)非竞争性抑制动力学 ① 抑制剂与酶的非活性部位结合，形成复合物，该复合物再与底物相结合； ② 底物与酶相结合生成的复合物，其中一部分与抑制剂相结合。 虽然，底物、抑制剂和酶的结合之间无竞争，但两者与酶形成的复合物可使酶的三维结构变化，导致酶催化反应速率下降。这种抑制成为非竞争性抑制。 E + I [EI] E +S [ES] P + E k1 k－1 k2 k3 k-3 ES + I [ESI] k-4 k-4 EI + S [EIS] k-5 k-5 E + I [EI] E +S [ES] P + E k1 k－1 k2 k3 k-3 ES + I [ESI] k-4 k-4 EI + S [EIS] k-5 k-5 经整理得到： （KI－为抑制剂的解离常数；vmax－有抑制剂存在时的最大反应速度） 非竞争性动力学常数的求取：作图法 * * 表明：非竞争抑制作用使vmax 下降了（1+[I ]/KI) （c)反竞争性抑制动力学 抑制剂不直接与酶结合，而只能与酶－底物的复合物[ES]相结合，生成[ESI]复合物，该复合物不能生成产物。 因为底物与酶的结合改变了酶的构型，出现了能与抑制剂相结合的中心，最终导致酶催化反应速率的下降。这种抑制成为反竞争性抑制。 [ES] + I [ESI] E +S [ES] P + E k1 k－1 k2 k3 k-3 [ES] + I [ESI] E +S [ES] P + E k－1 k3 k-3 经整理得到： （d)底物抑制动力学 有的酶促反应中，当高浓度底物时，其反应速率会随底物浓度的提高而下降，称为底物的抑制作用。 原因是多个底物分子与酶活性部位相结合后，形成的复合物不能分解为产物，从而阻碍了酶与底物的结合，使酶催化底物的反应速率下降。这种抑制成为底物抑制。 [ES] +S [SES] E +S [ES] P + E k1 k－1 k2 k3 k-3 竞争性动力学常数Km*、KI与Vmax的求取：作图法 斜率＝Km/KI Km* [ I ] -KI Km * * [ES] +S [