第九章生化药品解说.ppt

第九章 生化药品概论 9.1 生化药品的分类 氨基酸及其衍生物类药物 多肽和蛋白质类药物 酶类药物 核酸及其降解物和衍生类药物 糖类药物 脂类药物 9.2 生化药物的特点 生物原材料的复杂性生物材料的复杂性 生化物质种类多、有效成分含量低 生物材料的种属特性 药物活性与分子空间构象相关 对制备技术条件要求高 9.3 传统生化制药的一般工艺过程 9.3.1 生物材料的选择与保存 1.材料的选择 （1）来源 选材时应选用来源丰富的生物材料，做到尽量不与其他产品争原料，且最好能综合利用。如用胰脏生产弹性蛋白酶、激肽释放酶、胰岛素与胰酶等；用人胎盘生产γ-球蛋白、胎盘白蛋白、胎盘脂多糖及胎盘水解物；用人尿生产尿激酶、HCG等；用猪心生产细胞色素C和辅酶Q10等。 9.3.1 生物材料的选择与保存 （2）与有效成分含量相关的因素 ①合适的生物品种 ②合适的组织器官 ③生物材料的种属特异性 ④合适的生长发育阶段 ⑤合适的生理状态 9.3.1 生物材料的选择与保存 2.材料的采集与保存 （1）天然生物材料的保存 （2）动物细胞的保存方法及影响保存质量的因素 保存方法 组织块保存法 细胞悬液保存法 单层细胞保存法 低温冷冻保存 9.3.1 生物材料的选择与保存 ②影响保存质量的因素 细胞的冻存速度 保护剂 冻结方法 冻存细胞的复苏 9.3.2 生物材料的预处理 1.组织与细胞的破碎 （1）物理法 磨切法 压力法 震荡法 冻融法 （2）化学法 9.3.2 生物材料的预处理 （3）生物法 组织自溶法 酶解法 噬菌体法 9.3.2 生物材料的预处理 2.细胞的分离 3.制备丙酮粉 9.3.3 生物活性物质的提取 1.取方法的选择及注意的问题 常用的提取方法是固液提取，常用的溶剂是水。生物材料和目的物与提取有关的一些性状包括目的产物的溶解性质、相对分子质量、等电点、存在方式、稳定性、相对密度、粒度、黏度、含量、主要杂质种类及性质、相关酶类的特性等。 9.3.3 生物活性物质的提取 2.活性物质的保护措施 （1）采用缓冲系统 （2）添加保护剂 （3）抑制水解酶的作用 （4）其他保护措施 9.3.3 生物活性物质的提取 3.影响提取的因素 (1)温度 (2)酸碱度 (3)盐浓度 9.3.3 生物活性物质的提取 4.常用的提取方法 （1）用酸、碱、盐水溶液提取 （2）用表面活性剂提 9.3.3 生物活性物质的提取 （3）有机溶剂提取 固-液提取 液-液萃取 残存量公式： 对于所选的溶剂系统而言，目的物在生物材料中的分配系数K愈大，提取后的残留物质就愈多。 所用的溶剂愈多，残留量愈少。 提取次数愈多残留量亦愈少。 9.3.4 生物活性物质的浓缩与干燥 1.生物活性物质的浓缩 （1）盐析浓缩 （2）有机溶剂沉淀浓缩 （3）用葡聚糖凝胶(Sephadex)浓缩 （4）用聚乙二醇浓缩 （5）超滤浓缩 （6）真空减压浓缩 9.3.4 生物活性物质的浓缩与干燥 2.干燥 （1）提高药物或药剂的稳定性，以利保存与运输 （2）使药物或药剂有一定的规格标准 （3）便于进一步处理 9.3.5 生化物质的分离纯化 1.生物制药中分离纯化的特点 （1）生物材料组成非常复杂，一种生物材料常含成千上万种成分，各种化合物在形状、相对分子质量和理化性质等方面都各不相同，且又相似，其中有不少化合物迄今还是未知物，而且生物活性物质在分离过程中仍处于不断代谢变化中，因此常无固定操作方法可循。 （2）有些化合物在生物材料中含量极微，只有万分之一、十万分之一，甚至百万分之一。因此分离操作步骤多，不易获得高收率。 9.3.5 生化物质的分离纯化 （3）生物活性成分离开生物体后，易变性、失活，分离过程必须十分小心地保护这些化合物的生理活性，这也是生物制药中分离、制备的难点。 （4）生物制药中的分离方法几乎都在溶液中进行，各种参数(温度、pH值、离子强度等)对溶液中各种组分的综合影响无固定性，以致许多实验设计理论性不强，实验结果常常带有很大的经验成分。因此，实验要有一定的重现性，必须从材料、方法、条件及试剂药品等严格地加以规定。 9.3.5 生化物质的分离纯化 （5）为了保护目的物的生理活性及结构上的完整性，生物制药中的分离方法多采用温和的“多阶式”方法进行，即常说的“逐级分离”方法。为了纯化一种生化物质常常要联用几个甚至十几个步骤，并不断变换各种不同类型的分离方法，才能达到目的。因而操作时间长，工艺复杂，效率不高。近年发展起来的亲和层析法具有从复杂生物组成中专一“钓出”特异生化成分的特点，目前已在生物大分子，如酶、蛋白、抗体和核酸等的纯化中得到广泛应用。 9.3.5 生化物质的分离纯化 2.分离纯化的基本原理 （1）根据分子形状和大小不同进