原理是利用被分离的各个组分在互不相容的固定相和流动相中溶解度不同,在试样组分随流动相移动通过色谱柱的过程中,组分在两相中不断建立、打破和重新建立分配平衡。平衡时组分在固定相(s)和流动相(m)中的浓度之比成为分配系数。因为不同组分的分配系数不相同,他们在柱中经过多次的分配平衡后,产生了差速迁移,从何彼此分离。组分间分配系数K相差越大,越易分离。 * 4、凝胶层析 (Gel Penetration Chromatography, GPC) ① 葡聚糖凝胶 交联葡聚糖是由一定平均分子量的葡聚糖和交联剂(一般为环氧氯丙烷)以醚桥的形式互相交联形成的三维空间网状结构高分子材料,是水不溶性的白色球状颗粒,酸性环境能水解,碱中稳定。 在样品通过一定孔径的凝胶固定相时,由于流经路径的不同,使不同相对分子量的组分得以分离的方法。 表面有孔隙,其大小决定于聚糖与交联剂的配比及反应条件。 商品型号即按凝胶的交联度大小分类,并以吸水量来表示,英文字母G代表葡聚糖凝胶,后面的数字表示每克凝胶吸水量,再乘以10的值,G-25的吸水量为每克2.5ml。 交联度大→网状结构越紧密→孔隙越小→吸水膨胀越少。 型号 吸水量 (ml/g) 床体积 (ml/g) 分离范围 最小溶胀时间 肽与蛋白质 多
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