实验3-外界因素对细菌的影响.pptVIP

实验三 外界因素对细菌的影响 微生物学教研室 黄红莹 目的要求 1. 掌握高压蒸汽灭菌法和干烤法的使用方法及应用范围。 2. 掌握紫外线灭菌的原理。 3. 观察湿热对细菌的影响。 4. 熟悉常用化学消毒剂的种类。 5. 熟悉药敏实验的实验方法及意义。 常用灭菌方法 高压蒸汽灭菌法（示教） 121.3℃, 20min 最常用 耐高温、不怕湿的物品 高压蒸汽灭菌法 使用方法：用前三检查，灭菌三要点 注意事项：见课本 干烤法（示教） 160~170℃ 灭菌2个小时 使用方法 注意事项：见课本 适用范围：耐高热、不耐湿的物品。 玻璃容器、吸管、试管、注射器、培养皿等以及油脂、粉剂等怕水的物品。但不适用橡胶、易燃物质及水溶液的灭菌。 无菌室及超净工作台（示教） 超净工作台使用方法：见课本 湿热对细菌的影响 1. 实验材料：液体培养基3支/组，大肠杆菌，60℃水浴箱 2.实验方法：培养基接种细菌后放入60℃水浴箱10分、30分钟，取出后与对照管一起培养24h。 3. 结果观察 紫外线的杀菌作用 1.原理 波长为200~300nm的紫外线具有杀菌作用，能使相邻的两个胸腺嘧啶(T)聚合为二聚体，导致细菌死亡。 特点： 1.穿透力弱，仅能用于地面、空气、台面等的消毒。 2.对人体有害，加强防护。 2. 实验材料 菌种：葡萄球菌 大肠杆菌 其他：琼脂平板，纸片，镊子 3. 实验步骤： 1）均匀的涂布细菌于普通平板。 2）打开上盖，盖上黑纸板，暴露于紫外线下。 3）30min后取出，和上皿盖，置于37 ℃温箱培养24h。 紫外线的杀菌作用 观察结果。 消毒液的杀菌作用 1. 原理 蛋白质变性，干扰酶活性和代谢，损伤细胞膜等。 2. 实验材料 菌种：葡萄球菌 大肠杆菌 其他：琼脂平板，纸片，镊子 75％乙醇，络合碘，0.1％新洁尔灭、84消毒液 消毒液的杀菌作用 步骤： 在普通平板上均匀涂布细菌。 用镊子夹取蘸有不同化学消毒剂的滤纸片紧紧贴在琼脂上（75％乙醇，络合碘，0.1％新洁尔灭、84消毒液）。 置于37 ℃温箱培养24h。 观察结果。 生物因素对细菌的影响-药敏试验 1. 实验原理 抗生素具有杀菌抑菌作用，作用机制是抑制细胞壁的合成，干扰蛋白质及核酸的合成，干扰能量代谢等。 2. 实验材料 菌种：葡萄球菌 大肠杆菌 其他：琼脂平板，药敏纸片，镊子 3. 方法：涂细菌—放药敏纸片—培养 4. 结果判断：参考课本 药敏试验 人体皮肤表面细菌的检测 参见39页 讨论 常用的化学消毒剂有哪几种？ 使用高压蒸汽灭菌器的注意事项是什么？ * 物理法（高压蒸汽灭菌法，干烤箱，过滤器，紫外灯） 化学法（75％乙醇，络合碘，0.1％新洁尔灭） 生物法（各种抗生素药敏纸片） 高压蒸汽灭菌法的效果观察 紫外线的杀菌作用 *