对探究酵母菌呼吸方式的探究-厦门六中.docVIP

对“探究酵母菌呼吸方式”中检测酒精的试剂及方法的改进 福建省厦门第六中学 谢启燕 （361012） 摘要：重铬酸钾的酸性溶液，既可与酒精反应，也可与葡萄糖等还原性有机物反应，结果都呈现灰绿色，使实验的结果难以判定，本文对重铬酸钾酸性溶液的配制方法及检测酒精的方法做出改进，效果良好。 关键词：重铬酸钾酸性溶液 检测试剂配制 检测方法改进 “探究酵母菌呼吸方式”是《普通高中生物课程标准》中对“细胞代谢”这一教学内容提出的活动建议，人教版教材必修1《分子与细胞》P91～P92对该探究活动给予了一些启发学生思维的引导和建议，并绘出了探究装置的示意图，学生可以根据自己的兴趣来选择探究的内容，根据自己设计的合理可行的方式进行有益的探究尝试，这是一个很好的探究实验，既可以让学生加深对知识的理解，又锻炼了查阅资料、设计实验、动手操作、分析结果、改进完善等多方面的能力，还能够在探究的过程中让学生经历互助合作、成果共享等多方面的情感体验。 由于本实验持续的时间较长、实验操作难度较大、以及如何准确检测无氧呼吸的产物——酒精、怎样避免实验结果的混淆等问题，导致该探究活动一定程度上存在着认识上的混乱，也影响了该探究活动的普及开展。对CO2的检测和鉴定容易操作，而对酒精的鉴定则存在一些误解，为此，本文就“如何准确检测无氧呼吸的产物——酒精、怎样避免实验结果的混淆等问题”提出改进建议。 为方便理解和表述，将该实验的预期结果和实际结果等内容列表如下： 项目 A瓶酵母菌培养液 B瓶酵母菌培养液 装置及培养方法 取20g干酵母，分成两等份，分别放入锥形瓶A(500mL)和锥形瓶B(500mL)中。分别向A、B两瓶中注入240mL质量分数为5%的葡萄糖溶液， 按教材图示连接培养瓶， 用气泵连续通入除去CO2的空气 按教材图示连接培养瓶，密封培养 在25℃～35℃的环境中培养10～50min 取 样 分 析 试管编号 试管1 试管2 待检样品 加入：A瓶酵母菌培养液滤液2mL 加入：B瓶酵母菌培养液滤液2mL 检测试剂 分别滴加：0.5mL溶有0.1g重铬酸钾的浓硫酸溶液（体积分数为95%～97%）（下文称之为检测试剂①），并轻轻振荡，观察溶液颜色变化 预期现象 溶液不变成灰绿色（溶液呈橙黄色） 溶液变成灰绿色 预期结论 A瓶溶液中酵母菌进行有氧呼吸，没有产生酒精 B瓶溶液中酵母菌进行无氧呼吸产生酒精 实际现象 溶液变成灰绿色 溶液变成灰绿色 可能得出的结论和解释 A瓶溶液中酵母菌进行有氧呼吸，但可能由于通气状况不良，仍有部分酵母菌进行无氧呼吸，因此，产生了酒精，如果改善通气状况应能避免这一现象 B瓶溶液中酵母菌进行无氧呼吸产生酒精 疑问：加入检测试剂①后，A瓶的滤液出现的灰绿色颜色反应，果真是由于通气状况不良导致A瓶溶液中部分酵母菌无氧呼吸产生酒精所致吗？B瓶的滤液出现的灰绿色颜色反应一定能说明B瓶培养液中生成酒精了吗？ 通过查阅《无机元素化学》，查找到重铬酸钾在酸性条件下能将乙醇（俗称酒精）氧化，其反应的离子方程式如下： 在酸性较强重铬酸钾浓度较高的条件下，可以发生如下反应： 实际上，重铬酸钾在酸性溶液中是强氧化剂，与还原剂作用时其还原产物均为Cr3+ 。比如葡萄糖，其分子结构属于多羟基醛，也能象乙醇（C2H5OH）一样与重铬酸钾在酸性条件下发生反应，其化学反应式如下： （上述反应中的Cr3+呈现灰绿色，放置一段时间后，颜色变成天蓝色。） 取5%葡萄糖溶液2mL注入干净的试管中，加入检测试剂①，轻轻振荡，溶液呈现灰绿色，结果与A瓶滤液呈现的现象一致。 可见，葡萄糖和乙醇都能够与重铬酸钾反应生成绿色的物质Cr3＋。所以，A、B瓶的滤液出现颜色反应，都有可能是由于葡萄糖参与反应的缘故。另外，酵母菌在代谢过程中，生成的中间产物，也有些是具有还原性的，都可能生成灰绿色的产物，这些都使实验的结果难以判定。 在生物学有关杂志上，看到有人对该探究实验改进后，将实验的时间大大缩短，将教材中的8～10小时缩短到40～50分钟，甚至十分钟（如上表中的培养时间），在如此短的时间内，酵母菌培养液中的葡萄糖无法被消耗完（用斐林试剂可检测出在这么短的时间内，培养液中有葡萄糖等还原性物质的存在），如果根据这样的实验结果得出关于无氧呼吸和有氧呼吸的产物的结论，是不科学的。 对本实验中无氧呼吸产物酒精的鉴定方法可做如下改进，以利准确分析和判断。 1.按上表中所列的装置和培养条件，培养10～50min所生成的酒精量太少，检测现象不明显。经过多次实验摸索，将培养时间延长为1～1.5h，即可取得良好的实验效果。 2.改进检测试剂的配制 教材中介绍的检测试剂中重铬酸钾和硫酸的浓度过高，试剂颜色过深，不易观察。经过多次的实验对比，推荐按以下方法配制检测试剂：将7