半数致死量LD的测定.ppt

教学目标 一、概述 目的： 揭示毒性强度、选择性、发展过程及造成 的损害是否可逆。 新药从动物实验→临床应用的参考，新药 报批的必要条件。 　 药物毒性试验的分类： 　 急性毒性试验： 72小时 　 亚急性毒性试验：1-3个月 　 慢性毒性试验：3个月以上 　 特殊毒性试验：致癌性、致畸性、致突变性等 急性毒性试验 　定义：给予较大剂量的药物后，在较短时间内观察动物的中毒症状与死亡率。 　衡量急性毒性的指标——LD50 （二）半数致死量(LD50) 　定义： 　意义：药物急性毒性试验的一部分； 　　　　衡量药物急性毒性的指标； 　　　　计算药物的治疗指数，评估药物的安全性。 　　治疗指数(Therapeutic Index)=LD50/ED50 　　用于临床：TI10 LD50的特点： LD50测定的常用方法 　改良寇氏法 可直接用实验动物的死亡率进行计算，方法简单，计算简便。 　序贯法 用的动物少，比较节省，但是时间较长 　Bliss法 又称简化几率单位法，是公认最佳方法，但是其计算步骤繁杂。 二、实验目的 测定药物的LD50 了解常用的测定和计算方法 三、实验材料 昆明种小白鼠，体重18-22g 不同浓度的解磷定溶液 1ml 注射器 天平 四、实验步骤 3、实验结果 如果最小剂量组的死亡率为0，最大剂量组的死亡率为100％时，则 五、注意事项 　每组使用的解磷定溶液的浓度与剂量 　准确称重，精确计算给药量 　小鼠腹腔注射的规范操作 　注意观察中毒症状及出现时间、死亡时间 　数据处理的方法 现在开始做实验 六、结果汇总与讨论 新药临床前研究 思考题 　什么叫LD50？测定的意义是什么？ 　试讨论改良寇氏法和Bliss法测定 LD50各有什么优缺点。 实验三　药物毒性试验 ——半数致死量（LD50）的测定 潘夕春 TEL:803 E-mail:xichunpan@163.com 了解： 测定LD50的常用方法与LD50的计算 新药安全性评价的内容 掌握： 改良寇氏法测定药物LD50的方法 测定LD50的常用方法与LD50的计算 学习难点： 1 2 （一）药物毒性试验 1 2 ３ ４ 测量简单，准确性高，误差小，易重复。 50% LD50 死亡率 对数剂量 1 2 药物的剂量反应曲线上最敏感的一点。 0 0 1 3 动物死亡数 (只) 1.88 3.75 7.5 15 浓度 （g/L） 35.5 3 4# 75 3 3# 150 3 2# 300 3 1# 剂量(mg/kg) 动物数 (只) 组别 目的：找出0及100％死亡率的剂量范围。 1、预实验（已完成） 6.1 7.7 9.6 12 15 浓度 （g/L） 2.08 123 10 5# 2.18 154 10 4# 2.28 192 10 3# 2.38 240 10 2# 2.48 300 10 1# 对数剂量 剂量(mg/kg) 动物数 (只) 组别 注：动物死亡数为给药后2小时内的小鼠死亡数 解磷定LD50测定实验分组 2、正式实验 5 4 3 1 2 小鼠50只，称重，随机分组 n=10 腹腔注射 15g/L 解磷定溶液 0.2ml/10g 6.1g/L 解磷定溶液 0.2ml/10g 9.6g/L 解磷定溶液 0.2ml/10g 12g/L 解磷定溶液 0.2ml/10g 7.7g/L 解磷定溶液 0.2ml/10g 给药后2小时内记录各组小鼠死亡数 重点 6.1 7.7 9.6 12 15 浓度 （g/L） 2.08 123 10 5# 2.18 154 10 4# 2.28 192 10 3# 2.38 240 10 2# 2.48 300 10 1# 死亡率 (％) 动物死亡数 (只) 对数剂量 剂量(mg/kg) 动物数 (只) 组别 注：动物死亡数为给药后2小时内的小鼠死亡数 解磷定LD50测定实验结果 如果最小剂量组的死亡率大于0而小于30％，或最大剂量组的死亡率小于100％而大于70％，则 LD50=lg-1[Xm-i (∑P-0.5)] 3-Pm-Pn LD50=lg-1[Xm-i (∑P- 4 )] 注： Xm为最大剂量组的剂量对数， i 为相邻两组对数剂量之差值（大剂量组减去小剂量组）， P为各组死亡率， Pm为最大剂量组的死亡率，Pn为最小剂量组的死亡率。 1 2 4、结果处理 10 12g/L 死亡率 死亡数 10 10 10 10 动物数 6.1g/L 7.7g/L 9.6g/L 15g/L 剂量组 解磷定LD50测定实验结果汇总 3-Pm-Pn LD50=lg-1[Xm-i (∑P- 4 )] 运用公式计算LD50 LD50=lg-1[Xm-