异丙酚对发育期海马神经元凋亡的影响与RhoGTP酶在其中的作用研究.pdf

材料与方法……………………………………………………………．．59 结果……………………………………………………………………．．65 附图……………………………………………………………………一67 附表……………………………………………………………………．．71 讨{念……………………………………………………………………．．73 小结……………………………………………………………………．．75 参考文献………………………………………………………………．76 第四部分盐酸法舒地尔对异丙酚引起的发育期大鼠海马神经细胞凋亡 的保护作用及其机制研究 前言……………………………………………………………………．．79日Ⅱ舌……………………………………………………………………．．79 材料与方法……………………………………………………………．80 结果……………………………………………………………………．．85 附图………………………………………………………………………87 附表……………………………………………………………………．．91 讨{念……………………………………………………………………．．92 小结……………………………………………………………………．．93 参考文献………………………………………………………………．．94 结论…………………………………………………………………………．．97 综述Rho GTP酶在神经系统发育和神经元凋亡中的作用……………．．98 致谢…………………………………………………………………………120 个人简历……………………………………………………………………121 万方数据 中文摘要 异丙酚对发育期海马神经元凋亡的影响及RhoGTP酶 在其中的作用研究 摘 要 第一部分异丙酚对原代培养新生大鼠海马神经元的损伤作用 目的：观察异丙酚不同浓度和不同作用时间对原代培养的海马神经元 的损伤作用，倒置相差显微镜观察神经元形态，采用MTT法检测异丙酚 对发育期海马神经元活力的影响；用流式细胞术测定不同浓度异丙酚作用 异丙酚对发育期海马神经元细胞形态的影响。 方法：用原代培养4d左右的海马神经元，分另JJJJl入不同浓度的异丙 异丙酚处理海马神经元6、12、24、48h后，倒置相差显微镜观察神经元 同浓度异丙酚对海马神经元凋亡的影响。 结果：1MTT法检测结果显示异丙酚对海马神经元活力的抑制是有 用时间相同的情况下，随着浓度的升高，细胞活力显著下降(尸O．01)。 胞活力亦显著降低(P0．01)。2海马神经元经不同浓度的异丙酚处理不 同时间后，可以观察到神经元数量逐渐减少，细胞体积变小，折光性变差， 浓度升高到一定程度(601xg／m1)时，可以观察到神经突起断裂，甚至部 的结果表明，20vg／ml异丙酚对凋亡率的影响与对照组无显著差异， 万方数据 中文摘要 形态的结果显示，染色最终结果与MTT、流式细胞术趋势类似。随着异 丙酚浓度的增加，凋亡神经元数目随之增多，80pg／ml的异丙酚作用24h 后，神经元数量明显减少，有部分细胞核裂解为碎块，出现凋亡小体。 结论：异丙酚呈浓度及时间依赖性的抑制发育期海马神经元活力。高 浓度异丙酚呈浓度依赖性导致发育期海马神经元凋亡率增加。高浓度的异 丙酚处理神经元，对神经元形态和数量有明显影响。 第二部分RhoGTP酶在异丙酚对原代培养新生大鼠海马神经元毒性中 的作用 目的：检测不同浓度异丙酚对Rho 异丙酚导致的发育期海马神经元损伤的影响。 方法：将培养4d的海马神经元分为四组，每组加入不同浓度的异丙 blot 养4d的海马神经