葡萄糖对糖尿病患者外周血内皮祖细胞的影响和机制研究.pdf

摘要 摘 要 背景和目的： 糖尿病(diabetes mellitus，DM)是一组发病机制尚未完全阐明的以血糖水平 升高为特征的内分泌代谢性疾病。DM 患者血管病变后血管新生涉及包括内皮祖 细胞（endothelial progenitor cells，EPCs ）在内的多种因素的影响。骨髓(Bone marrow ，BM)来源的 EPCs 经动员可进入外周血(mobilized peripheral blood，MPB) 中，并趋化至缺血部位，为缺血性疾病的治疗带来了新的契机，已成为新生血 管形成的研究靶点。因此本文通过观察不同糖代谢紊乱状态下 EPCs 增殖、迁移 及血管形成能力，以阐明糖代谢紊乱对EPCs 生物学功能的影响及机制，为 EPCs 在糖尿病患者并发症的防治方面提供理论依据。 方法： 选择我院内分泌科及心内科 T2DM 患者 20 例和正常健康者 10 例；采用密 度梯度离心法从人外周血中分离出单个核细胞（Mononuclear cells ，MNCs ）并 + + + 培养；流式细胞术鉴定 EPCs 表面的标志：CD34 、CD133 ( AC133 ) 及 + + VEGFR-2 ( KDR ) ；体外观察糖代谢紊乱状态下EPCs 迁移及血管形成能力；不 同浓度葡萄糖（5，10，20 ，30mmol/L ）与EPCs 体外培养，观察葡萄糖对 EPCs 的增殖能力的影响及细胞CXCR4 的表达。 结果： 应用流式细胞术鉴定 EPCs 表面的标志：CD34 占(36.49 ±1.95)%，表达 CD133 占(18.72 ±1.24)%，表达 KDR 占(75.28 ±4.30)% 。单纯糖尿病患者的 EPCs 较健康人的 EPCs 迁移能力及血管新生能力减弱，而糖尿病并发症患者的 EPCs 的迁移能力、血管新生能力降低更明显。随着葡萄糖浓度的升高EPCs 体外增殖 能力减弱（P0.05 ）。随着葡萄糖浓度的升高体外培养的 EPCs 表达 CXCR-4 mRNA 和蛋白显著降低（P0.05 ）。DM 患者血浆及细胞培养液中 SDF-1α 浓度 较健康人明显减少，并发症组患者更显著。 结论： T2DM 患者 EPCs 的生物学活性明显减弱，尤其是糖尿病并发症患者。DM 患者血浆及细胞培养液中 SDF-1α浓度较健康人明显减少，有并发症者减少更显 著。葡萄糖可以通过 SDF-1/CXCR4 轴来影响 EPCs ，并且随着葡萄糖浓度增高， II 万方数据 摘要 其生物学活性抑制更明显。 关键词： 内皮祖细胞；糖尿病；葡萄糖；SDF-1/ CXCR4 III 万方数据 Abstract ABSTRACT Background and Objective ： Diabetes (diabetes mellitus, DM) is a group of endocrine and m