KiSS1基因对妊娠滋养细胞生物学行为影响和其在复发性流产中作用机制的研究.pdfVIP

KiSS-1 基因对妊娠滋养细胞生物学行为影响及其在复发性流产中作用机制的研究 中文摘要 KiSS-1 基因对妊娠滋养细胞生物学行为影响 及其在复发性流产中作用机制的研究1 中文摘要 目 的：探讨 KiSS-1 基因对妊娠滋养细胞生物学行为的影响及其在复发性流产 中的作用机制。 方 法：①免疫组织化学方法检测 kisspeptin 、GPR54 在复发性流产患者绒毛及蜕 膜组织中表达水平；②构建重组质粒 pcDNA3.1 （+ ）-KiSS-1 ；③将重组质粒 pcDNA3.1 （+ ）-KiSS-1 转染至人滋养层肿瘤 JAR 细胞株，建立单克隆细胞系；④应用 RT-PCR 及 Western Blot 方法分别检测转染细胞 KiSS-1 的mRNA 及编码多肽 kisspeptin 表达； ⑤检测 KiSS-1 基因及外源性 kisspeptin 对 JAR 细胞生长增殖、软琼脂克隆形成能力 及迁移侵袭能力的影响。 结 果：①复发性流产患者绒毛 kisspeptin、GPR54 的表达均明显低于正常妊娠者 （P0.05 ），蜕膜组织kisspeptin 的表达明显低于正常妊娠者（P0.05 ），蜕膜组织中GPR54 的表达在两组间无明显差异；②成功构建重组质粒 pcDNA3.1 （+ ）-KiSS-1，并经 PCR 和测序鉴定无误；③将重组质粒 pcDNA3.1 （+ ）-KiSS-1 成功转染至人滋养细胞肿瘤株 JAR 细胞；④筛选出稳定转染的细胞，并通过 RT-PCR 和 Western Blot 鉴定目的基因 KiSS-1 mRNA 和编码多肽 kisspeptin 均成阳性表达；⑤KiSS-1 基因和 kisspeptin 对 JAR 细胞的生长增殖及克隆形成能力无影响，但明显抑制其迁移和侵袭能力。 结 论： Kisspeptin 在复发性流产患者母胎界面绒毛和蜕膜组织的表达均低下， GPR54 在复发性流产患者母胎界面绒毛组织表达低下。KiSS-1 基因及其产物 kisspeptin 能显著抑制滋养细胞迁移及侵袭能力，推测 KiSS-1 基因在妊娠期母胎界面 的表达调控对妊娠的维持起重要作用，其表达异常与复发性流产有关。 关键词：KiSS-1 ；kisspeptin ；GPR54 ；复发性流产 作 者 ：田冀雯 指导老师 ：张 弘 1 基金项目：苏州市科技局计划项目（SYS201348） I   英文摘要 KiSS-1 基因对妊娠滋养细胞生物学行为影响及其在复发性流产中作用机制的研究 Study on the effect of KiSS-1 on the biological behavior of human trophoblast cell and mechanisms in recurrent spontaneous abortion Abstract AIM: To explore the effect of KiSS-1 on the biological behavior of human trophoblast cell and mechanisms in recurrent spontaneous abortion. METHODS:①Compared the expression of kisspeptin and GPR54 in maternal-fetal interface of recurre