第三章 动物细胞工程制药概要.pptVIP

第三章 动物细胞工程制药 3.1.1 生产用动物细胞的要求和获得 生产用动物细胞的要求 早期规定：只有从正常组织分离的原代细胞才能用于生产生物制品，如鸡胚细胞、兔肾细胞等。 第二阶段：二倍体细胞，如WI-38, 2BS等。 当前：按照美国FDA规定，各国参照执行。异倍体细胞 生产用动物细胞的获得 原代细胞：直接取自动物组织、器官，经粉碎、消化而获得的细胞悬液。 二倍体细胞：原代细胞经过传代、筛选、克隆，从而从多种细胞成分的组织中挑选并纯化出某种具有一定特征的细胞株。 转化细胞系：这类细胞是通过某个转化过程形成的，它常常由于染色体的断裂变成了异倍体，从而失去了正常细胞的特点，而获得无限增殖能力。 融合细胞系：由两个或两个以上的合并成一个细胞的过程。 重组工程细胞系：采用基因工程手段构建的各种工程细胞。如BHK-21, C127, CHO-K1, COS, MDCK, Namalwa等。 二倍体细胞特点 染色体组型仍是2n的核型； 具有明显的贴壁依赖和接触抑制特性； 只有有限的增殖能力，可连续传代培养50代； 无致瘤性。 细胞融合方法 仙台病毒融合法 聚乙二醇融合法 电融合法 3.1.2 基因工程细胞的构建和筛选 真核细胞基因表达载体的构建：通常利用杆状病毒载体和穿梭质粒载体。 基因载体的导入和高效表达工程细胞株的筛选： 3.1.3常用生产用细胞特性 3.1.4 细