第三章发酵工业培养基方案.ppt

生命科学学院微生物教研室 第三章 发酵工业培养基 第一节 培养基概述 培养基是提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所需要的按一定比例配制的多种营养物质的混合物。 一、发酵工业培养基的基本要求 1、必须提供合成微生物细胞和发酵产物的基本成分。 2、有利于减少培养基原料的消耗，即提高单位营养物质的转化率。 3、有利于提高产物浓度，以提高单位容积发酵罐的生产能力。 4、有利于提高产物的合成速度，缩短发酵周期。 5、尽量减少副产物的形成，便于产物的分离纯化。 6、原料价格低廉，质量稳定，取材容易。 7、所用原料尽可能减少对发酵过程中通气搅拌的影响，利于提高氧的利用率，降低能耗。 8、有利于产品的分离纯化，并尽可能减少产生“三废”物质。 二、设计培养基四个原则 1、目的明确 2、营养物协调 3、物理化学条件适宜 （1）pH值 （2）氧化还原势 4、经济节约 三、发酵培养基的成分 1.碳源： 凡是可以作为微生物细胞结构或代谢产物中碳素来源的营养物质，称为碳源。 目前除了个别发酵工业需用较纯的糖类外，多数微生物发酵工艺生产中所用的碳素原料为： 农副产品（玉米淀粉、土豆淀粉、小麦淀粉等）和工业生产的废弃物（糖蜜、酒精废液、纸浆废液等）。 2.氮源 氮源是指构成微生物细胞和代谢产物中的氮素的营养物质。 根据需要使用无机氮源、有机氮源或二者混合使用。 有机氮源有花生饼粉、黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、酵母粉、酒糟等。 无机氮源有硫酸铵、硝酸盐、氯化铵、磷酸氢二铵和氨水等。 3.能源 工业上常用化能异养微生物，故能源常由碳源提供。 4.无机盐 无机盐类有磷酸氢二钾、磷酸二氢钾和硫酸镁等。 5.生长因子 工业上常用天然培养基，营养丰富，一般不需要另外加入。 6.水 对于发酵工厂来说，恒定的水源是至关重要的。因为在不同水源中存在的各种因素对微生物发酵代谢影响甚大。 水源质量的主要考虑参数包括；pH值、 溶解氧、可溶性固体、污染程度以及矿物质组成和含量。 7.其他 (1)前体： 指那些加入到发酵培养基后，能基本上不改变自身的分子结构而直接被微生物在生物合成过程中结合到产物分子中去，从而在一定条件下控制产物的合成和提高产量的那些物质。 (2)促进剂： 指那些既不是营养物又不是前体却能提高产量的添加剂。 如在底物和产物均为不溶或微溶水的发酵液中加入表面活性剂不仅可使固形物分散均匀，也可以提高酶活力，从而有利于微生物的利用，以提高产量。 促进剂的种类： 表面活性剂（吐温40、60、80）； 洗净剂LS（高级脂肪酰胺磺酸钠）； 黄血盐及甲醇等。 (3)抑制剂： 指在发酵过程中加入的能抑制微生物某些代谢途径的进行而使另一代谢途径活跃，从而积累人们所需产物的那些物质。 常用的抑制剂有亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、溴化剂等。 例如在生产甘油的发酵液中加入亚硫酸氢钠能抑制产乙醇的代谢途径而大量形成甘油。 （4）消沫剂 工业发酵中常用一些试剂消除发酵中产生的泡沫，防止逃液和染菌，以保证生产的正常运转。 常用的消沫剂有植物油脂（玉米油、豆油）、动物油脂（鲸鱼油、猪油）和化学合成的高分子化合物。 四、培养基的类型 工业上培养基的类型可分为三类： （一）根据对培养基成分了解的程度分类 1、天然培养基(natural medium) 凡利用生物的组织、器官及其抽取物或制品配成的培养基，称为天然培养基。 优点是配制方便、种类多样、价格低廉、营养丰富。缺点是化学成分不清楚、不稳定。 2、合成培养基 (synthetic medium) 是一类按照微生物的营养要求，使用成分完全了解的化学药品配制而成的培养基称为合成培养基。 优点是成分已知、精确、重复性好。缺点是价格较贵，配制麻烦，且微生物生长较慢。 3、半合成培养基(semi-defined medium) 指一类主要以化学试剂配制，同时还加有某种天然成分的培养基。 严格地讲，凡含有未经特殊处理的琼脂的任何合成培养基，实际上都是半合成培养基。 实验室中应用的大多数培养基和工业发酵生产用培养基都是半合成培养基。 （二）按物理状态分：固体培养基、半固体培养基和液体培养基。 1、液体培养基(liquid medium) 各营养成分按一定比例配制而成的水溶液或液体状态的培养基称为液体培养基。 2、固体培养基 固体培养基一般是指液体培养基中加入一定量的凝固剂（琼脂、明胶、和硅胶）配制而成的固体状态的培养基。 3、半固体培养基(semi-solid medium) 半固体培养基是在液体培养基中加入0.5%左右的琼脂而配制的固体状态的培养基。 4、脱水培养基（dehydrated culture media） 指含有除水以外的一切成分的商品培养基，使用时只要加入适量水分并加以灭菌即可，是一类成分精确和使用