全优课堂·2016高考生物一轮配套课件：11.43生物技术的应用、酶分析研究和应用.pptVIP

第43课时　生物技术在食品加工 及其他方面的应用酶的研究和应用 2．植物激素与组织培养 (1)生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，其作用及特点： ①在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。 ②使用顺序不同，结果不同，具体如下： 3．影响植物组织培养的因素 (1)材料：植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。一般来说，容易进行无性繁殖的植物容易进行组织培养。嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化。 (2)营养：常用的培养基是MS培养基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co，有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。 提醒　培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压。 (3)环境条件：pH、温度、光照等环境条件。如菊花组织培养所需pH为5.8，温度为18～22℃，光照条件为每日用日光灯照射12小时。 【对位训练】 1．紫草素是紫草细胞的代谢产物，可作为生产治疗烫伤药物的原料。研究人员欲用植物组织培养技术通过培养紫草细胞生产紫草素，下列相关操作不合适的是(　　) A.对作为外植体的紫草叶片进行消毒处理既能保证细胞活性也可减轻污染 B.培养基中只加入细胞分裂素以保证已分化的植物细胞脱分化形成愈伤组织 C.调节植物激素的种类和比例以保证愈伤组织 D.在培养细胞的过程中要不断通入无菌空气以保证氧气的充足供应 【答案】B 1．原理、方法和目的 2.实验步骤及注意事项 (1)步骤：提取血细胞核物质(蒸馏水涨破)→溶解(2 mol/L的NaCl溶液)→过滤(除杂质)→析出(滴蒸馏水，降NaCl溶液浓度至0.14 mol/L)→过滤→再溶解(2 mol/L的NaCl溶液)→过滤→进一步提纯(体积分数为95%的冷却酒精)→鉴定。 (2)鉴定 (3)注意事项 ①制备鸡血细胞液时，要在取鸡血的同时加入柠檬酸钠，静置后上层是血清，下层为所需要的血细胞。 ②两次加蒸馏水的目的不同，一是涨破细胞，二是稀释溶液。 ③鉴定DNA时需沸水浴加热。 ④二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。 【对位训练】 2．(2014·汕头模拟)下列有关“DNA的粗提取液和鉴定”实验的叙述正确的是(　　) A．去除DNA杂质时，可直接在滤液中加入酒精反应10～15 min B．在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成紫色 C．析出DNA时可用玻璃棒轻缓搅拌，可提高DNA的提取量 D．DNA对高温的耐受性一般要比蛋白质强 【答案】D 【解析】A错误，去除DNA杂质时，可直接在滤液中加入嫩肉粉(含蛋白酶)反应10～15 min。B错误，在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。C错误，析出DNA时用玻璃棒轻缓搅拌，不能提高DNA的提取量，而是保持DNA分子的完整性。D正确，大多数蛋白质难忍受60～80 ℃的高温，而DNA在80 ℃以上才会变性。 1．原理：DNA复制。 2．条件：模板、原料、酶、ATP。 3．场所：体外PCR扩增仪。 4．方向：DNA复制的具体过程涉及DNA双链的方向。DNA的两条链是反向平行的，为了明确表示DNA的方向，通常将DNA的羟基(—OH)末端称为3′端，两磷酸基团的末端称为5′端。DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从3′端延伸DNA链，因此，DNA复制需要引物。当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链，DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。 5．过程 (1)变性：当温度上升到90℃以上时，双链DNA解旋为单链，如下图： 6．检测PCR扩增效果 (1)将样品进行50倍稀释：取2 μL PCR反应液，加入98 μL蒸馏水。 (2)以蒸馏水作为空白对照，在波长260 nm处，将紫外分光光度计的读数调节至零。 (3)将步骤①中的DNA稀释液加入到厚度为1 cm的比色杯中，测定其在260 nm处的光吸收值(用A260 nm表示)。 注意　DNA在260 nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰，可以利用DNA的这一特点进行DNA含量的测定。 (4)根据下面的公式计算DNA含量。 DNA含量(μg/mL)＝50×A260 nm×稀释倍数 注意　据测定，1 μg/mL的DNA在厚度为1 cm比色杯中，OD260为1相当于50 μg/mL的双链DNA。以此为标准，可以计算出样品中的DNA浓度。 7．PCR技术的应用 PCR技术模拟细胞内DNA的复制过程，实现对某一段DNA的扩增。PCR技术能在几小时内将极微量的DNA特异性地扩增上百万倍，从而有效解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的难题，大大提高了对DNA分子的分析和检测能力，被