miR200c对卵巢上皮性癌细胞侵袭、迁移和增殖能力影响的研究.pdf

中文摘要 mi R200c对卵巢上皮性癌细胞侵袭、迁移及增殖能力影响的研究 摘 要 ovarian 卵巢上皮性癌(epithelial 性最常见的妇科恶性肿瘤之一，由于缺乏敏感有效的肿瘤标志物，使得卵 巢癌的早期确诊率很低，尽管应用现代抗肿瘤药物配合肿瘤细胞减灭术治 疗，晚期卵巢癌患者的5年生存率依然较低，约为30％。术后复发和肿瘤 耐药成为卵巢癌治疗的最大难题，因此新的卵巢癌治疗手段的研发是妇科 亟待解决的问题。 有研究发现包括卵巢癌在内的多种人类肿瘤组织中miR200家族表达 谱发生改变；许多学者在对犬的肾细胞和人类的胰腺癌、直肠癌、前列腺 的表达。上皮向间质转化(epithelial．mesenchymal 瘤的侵袭和转移密切相关。E．cadherin是钙依赖性跨膜粘连蛋白的一种， 主要分布于上皮细胞表面，介导细胞间的粘附作用。波形蛋白(Vimentin) 是间质细胞骨架中最主要的中间纤维蛋白，Vimentin被认为是间皮细胞的 标志蛋白。E盒结合锌指蛋白(zincE．box finger binding 是一种重要的细胞核转录因子，它与E．cadherin基因的启动子序列中的锌 瘤表面抗原，它在上皮性卵巢癌组织中的表达显著上调。有研究表明间皮 素能增强卵巢癌细胞的增殖及粘附侵袭能力。间皮素与CAl25互为配体。 国内关于miR200c对卵巢癌细胞的增殖及侵袭迁移能力的影响鲜有报道。 目的：通过瞬时转染miR200cmimic，上调卵巢癌细胞株SKOV3、 侵袭迁移能力的影响，初步探讨miR200c对卵巢癌细胞增殖及侵袭迁移 的调控机制。 方法： mimic 处理组、negative 对表达量。 中文摘要 2 mimic(Onmol／L、25nmo儿、 MTT法检测转染不同浓度miR200c 50nmol／L、100nmol／L、200 48h、72h)， nmol／L)，培养不同时间(24h、 对SKOV3、HO．8910细胞的增殖能力的影响。 3Transwell小室检测各组细胞迁移及侵袭能力的变化。 1、E．cadherin、 4应用Western Vimentin的 blotting检测各组中ZEB 表达变化。 5酶联免疫吸附实验检测间皮素和CAl25的表达。 6统计方法：试验数据应用SPSS13．0统计软件处理，各实验均重复 3次。计量资料以均数4-标准差(i士s)表示，各组间的比较采用单因素方差 分析，检验水准铲O．05。当P0．05时，差异有统计学意义。 结果： 1 RT-PCR检测各组miR200c的相对表达量。 1 高(氏O．05)，而SKOV3．neg和HO．89 和HO．8910相比差异无显著性(胗O．05)。 2 转 染不同浓度的miR200c 改变(PO．05o转染相同浓度的miR200c HO一8910的增殖亦无明显改变(胗O．05)。 3miR200c抑制细胞的侵袭能力。上调miR200c的表达后， SKOV3、HO．8910组相比细胞数无明显改变(胗O．05)，提示miR200c 可以显著抑制SKOV3、HO．8910细胞的侵袭能力。 4miR200c抑制细胞的迁移能力。上调miR200c的表达后， 制。