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第5章 研究方法 第一节 实验毁损法 第二节 神经活动的记录与诱发 1 脑损伤的行为效应评估 1 神经活动记录 2 脑毁损模型 2 脑代谢与突触活动记录 3 立体定位手术 3 脑分泌测量 4 组织学方法 4 神经活动的诱发 5 束路追踪法 5 脑内电刺激的行为效应 6 活体人脑研究 第三节 神经化学方法 第四节 遗传学方法 1 合成特定神经化学物的神经元定位 1 双生子研究 2 特定受体定位 2 寄养子研究 3 靶突变 第一节 实验毁损法 1 脑损伤的行为效应评估 1）脑毁损研究定义：损毁部分脑区，观察动物随后的行为，称为脑毁损研究。是研究脑功能的最重要的方法之一。 2）脑毁损研究的用途： 发现不同脑区的功能 执行特定行为所需的功能 3）解释脑损伤结果： 必须非常谨慎。 大脑所有区域都是相互关联的事实使损毁研究的解释复杂化。 A.射频损伤 B. 神经化学损伤 原理：用神经毒剂或化学阻断剂来干扰脑内蛋白质，核酸或其它一些神经递质的代谢来导致脑机能失调。 特异性高、选择性强 永久性的脑损伤，非暂时脑损伤（可逆性脑损伤）。 兴奋性毁损 注射红藻氨酸进入特定脑区，兴奋谷氨酸，损伤神经元胞体，但不影响过路神经纤维。 射频损伤、兴奋性毒性毁损对脑组织造成损伤，甚至引起额外的脑损伤，从而影响动物行为。难以准确确定动物行为缺陷的脑部位。 假损伤： 其余操作与射频损伤、兴奋性毒性毁损一样，但不通电、不注射红藻氨酸，作为对照组，如果假手术的结果与脑毁损结果不同，说明特定部位的脑毁损手术导致行为缺陷。 可逆性脑损伤 . 冷冻法 原理：利用冷冻探头，放在开颅后的硬脑膜下，使温度降至20oC 时，即可产生大脑皮质局部性短暂功能阻断效应。拿掉冷冻探头，脑组织温度回升，其功能不仅可以恢复，尚无组织变性的继发性后作用。 C 脑内化学刺激 a .化学刺激 选择性强，容易阐明其机理。 对神经的传导发生直接影响。 b.工具性药物： 局麻药、毒蝇蕈醇 3 脑立体定位技术 A. 脑图谱 参考点：囟门、前囟。 B.立体定位仪 三个主要部分： 1. 标尺。 2. 电极和导管夹持器。 3.固定动物头部的耳杆、门齿沟。 4 组织学方法 5 束路追踪法 5.1 追踪传出轴突法 5.2 追踪传入轴突法 5.3 跨神经追踪 5.1 追踪传出轴突法：单一神经元完整形态学变化  5.2 追踪传入轴突法： 5.3 跨神经追踪法 伪狂犬病病毒（猪疱疹病毒疫苗）注入脑区 ， 神经元感染并传递到其他神经元，引起神经元死亡，从而追踪顺行或逆行的神经通路 将顺行和逆行标记法和跨神经追踪法结合，可揭示神经结构的相互联系，提供脑组织的环路图。（见图5.15） 6 活体人脑研究 6.1计算机轴断层描技术 6.2核磁共振显影技术 6.1 计算机轴断层描技术（computerized axial tomography - CT） 原理：将X光照相和计算机处理方法结合起来观察活脑的组织病变。 优势： 脑结构成像 局限： 空间分辨率稍显不足， 病变结构需足够大 6.2 核磁共振显影技术（magnetic resonance imaging, MRI） A.核磁共振现象（ Nucleus magnetic resonance，NMR） 在一个极强的磁场中，脑内某些物质的原子核在射频电磁波的能量激发下吸收能量，随后又能发射能量的现象。 B.磁共振显影技术（ magnetic resonan