损伤血瘀证微观细胞凋亡、免疫机制和中医宏观思维诊断的比较研究.pdf

其余组分别在相应的时象点处死大鼠，并分离其骨骼肌细胞和血液，测试骨骼肌 细胞凋亡情况、病理切片及血液的免疫细胞因子指标 IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、 IL-10 和 TNF- α，动态观察损伤后骨骼肌细胞凋亡、组织病理状态、全身免疫变 化情况，通过损伤血瘀证早期的各种客观化的实验数据，判断损伤血瘀证早期的 证本质。同时结合中医诊断理论,通过对中西医的系统比较,探索中医诊断学宏观 与微观，局部与整体，静态与动态相统一的理论基础。 结果： 1.AP-TUNNEL 法测试推算出损伤早期（1 周以内）凋亡水平的基本规律。 2.流式细胞仪测 caspase-3 染色率与细胞凋亡水平具有高度的相关性。 3.细胞因子测定 IL-2 的变化趋势明确，形成一个先扬后抑的曲线；IL-4 在损伤后平稳上升，24H 后形成快速上升趋势，在 72H 形成一个高点，逐步回落， 并显著低于伤后 48 小时的水平；IL-6 的在损伤血瘀证模型成功之后持续上升， 在 72H 形成一个高点，逐步回落至损伤后 48H 的水平；IL-8 的在损伤血瘀证模 型成功之后持续上升，在 72H 形成一个高点，在伤后第 168 小时，即第 7 天形成 回落至损伤后48H 的水平；IL-10 的在损伤血瘀证模型成功之后持续上升，在 72H 形成一个高点，在伤后第 168 小时，即第 7 天形成回落至损伤后 48H 的水平；TNF- α的在损伤血瘀证模型成功之后持续上升，在48H 形成一个高点，在伤后第 72 小时，回落至后损伤后 24H 的水平，并且持续下降。 4 .HE 染色观察骨骼肌组织病理变化情况，可以初步判断损伤血瘀证早期（1 周）的病理分期：①出血期：0-24 小时;②炎性期：24-72 小时;③炎性及肉芽修 复期：72-168 小时 结论： 1.定量打击法造成的损伤血瘀证导致和加速细胞凋亡。 2.通过检测阳性率较高的凋亡调节蛋白酶caspase-3与凋亡有着必然的联 系。 2 3.通过观察细胞因子IL-2，IL-4，IL-6，IL-8，IL-10，TNF- α，发现损伤 血瘀证凋亡变化趋势与机体免疫细胞因子之间存在着双向动态平衡的偶联关系。 4.通过镜下HE染色，进一步证实出血、免疫反应、凋亡、修复之间具有确切 的周期性联动关系。 5.从临床意义分析，伤科一周左右的水肿是可能免疫系统性反应降低导致的 细胞凋亡产生的。 6. 宏观与微观相结合，局部与整体相结合，静态与动态相结合是揭示损伤 血瘀证证本质，促进中医诊断学加速发展的理想之路。 关键词： 损伤血瘀证 凋亡 免疫 宏观 微观 3 Abstract Purpose: The topic to be from apoptosis, immune cells the perspective of injury research stasis for the future from a clinical point of skeletal muscle apoptosis, immune injury blood stasis point of effective diagnosis and a reasonable grasp of different pathological cycle of drug use and provide experimental period room basis. Through exploration and research of this thesis, not only for the injury blood stasis syndrome make an important contribution to the objective, and more able to TCM Syndrome supplement the scientific content of the unity of the macro and micro, local and global unity ，static and dynamic unity. Method: 80 SD rats were random