铁过负荷对小鼠血脂代谢和相关细胞因子作用研究.pdfVIP

目 录 摘要……………………………………………………一1一 主要英文缩略词表…………………………………………．．一15一 刖舌……………………………………………………一1一前言……………………………………………………一1‘7一 第一部分铁过负荷对小鼠血脂代谢的影响………………………．一19一 一、材料与方法……………………………………．．．一19一 二、结果……………………………………．…．．．．一28一 三讨论……………………………………………一30一 四、参考文献………………………………………．．一32一 第二部分铁过负荷小鼠血清中各类细胞因子含量及脂肪组织mRNA的变化．一34一 一、材料与方法………………………………………一34一 二、结果………………．…………………………．一39一 三、讨论…………………………………………．．一42一 四、参考文献………………………………………．．一45一 第三部分不同浓度铁对脂肪细胞细胞因子分泌的影响………………一48一 一、材料与方法………………………………………一48一 二、结果…………………………………………．．一55一 三、讨 论……．．……………………．…………．．．一62一 四、参考文献………………………………………．．一65一 第四部分外源性脂联素补充对铁过负荷小鼠血脂代谢紊乱的影响……．一67一 一、材料与方法…．．…………………………………．一67一 二、结果…………………．………………．……．．一73一 三、讨论…………………………………………．一76一 四、参考文献……．……．…………………………．．．一78一 全文总结…………．．．……．…．…………………．．……．．一80一 综述…………………………………………………．．一81一 在读期间发表的文章及著作…………………………………．．一90一 致谢…………………………………………………．．一91— 铁过负荷对小鼠血脂代谢及相关细胞因子作用研究 摘要 研究背景 铁是人体含量最多的一种必需微量元素。长期以来，对铁代谢的研究主要 集中在铁缺乏／缺铁性贫血的防治。随着人们对铁代谢认识的发展，如今已经从 铁缺乏扩展到机内铁过负荷的原因以及铁代谢紊乱引发的一系列相关疾病的机 制探讨，尤其是铁过量与代谢性疾病之间的关系。 近年来，诸多流行病学调查已经明确糖尿病，非酒精性脂肪肝等代谢性疾 病患者存在铁过负荷。前瞻性研究进一步发现体内铁蛋白、转铁蛋白的升高与 代谢综合征的发病率成正相关。多项META分析得出结论：机体铁含量过高是 引起糖脂代谢紊乱、心血管疾病等发病的诱因之一，但具体机制尚未明确。血 脂代谢的紊乱是代谢综合征的主要症状之一，血脂参数的持续异常显著增加心 血管疾病的发病风险。流行病学调查显示铁过负荷人群常常伴有高脂血症， LDL．C、HDL．C等脂蛋白水平改变；动物给予单纯的高铁膳食也可见到血脂参 数的异常。由于肝脏是调节脂代谢的重要器官，铁沉积于肝脏引起的氧化应激 损伤是导致脂代谢紊乱的一个原因。事实上，机体铁沉积不仅仅发生在肝脏， 脂肪、脑、胰腺等均有铁沉积的存在。 与肝脏同样，脂肪组织是维持脂代谢平衡的重要器官。近年来，有研究证 实脂肪组织是一个敏感的铁感应器官，它可以表达所有与铁代谢相关的调控、 储存及转运的因子如铁蛋白、铁调节蛋白、转铁蛋白受体、HEF、hepeidin、 ferroportin等。目前，脂肪组织不再是一个单纯的储脂产能组织，其分泌的细胞 因子如瘦素、脂联素等对于维持机体能量和糖脂代谢的平衡具有重要的调节作 用。是否脂肪组织像肝脏一样，会因为铁过负荷影响其内分泌功能，成为铁过 量引起脂代谢紊乱的机制之一，这方面研究一直没见报道是个值得探索的问题。 因此，本实验通过给小鼠腹腔注射右旋糖酐铁，观察血脂代谢指标的变化， 并且用高通量细胞因子芯片观察血液中与脂代谢相关细胞因子的变化特点；进 一步细胞实验证明不同浓度的结合型和离子型的铁干预能否直接影响脂肪细胞 因子的分泌；最后在铁过负荷动物造模的同时，补充与血脂代谢最为密切的细 胞因子脂联素至正常水平，检测脂联素作用的酶类活性及血脂参数的恢复情况， 明确脂联素异常