木质纤维素组分测定方法.docxVIP

Sluiter, J.B., et al. (2010). “Compositional Analysis of Lignocellulosic Feedstocks. 1. Review and Description of Methods.” J. Ag. Food Chem. (58:16); pp. 9043-9053. Templeton, D.W., et al. (2010). “Compositional Analysis of Lignocellulosic Feedstocks. 2. Method Uncertainties.” J. Ag. Food Chem. (58:16); pp. 9054-9062. Scarlata, C.J.; Hyman, D.A. (2010). “Development and Validation of a Fast High Pressure Liquid Chromatography Method for the Analysis of Lignocellulosic Biomass Hydrolysis and Fermentation Products.” J. Chromatogr. A (1217:14); pp. 2082-2087. 附 录 A A.1 纤维素、半纤维素、木质素的测定——Van Soest 法 A.1.1 基本原理 植物性饲料如一般饲料、牧草和粗饲料经中性洗涤剂（3％十二烷基硫酸钠）分解，则大部分细胞内容物溶解于洗涤剂中，其中包括脂肪、糖、淀粉和蛋白质，统称之为中性洗涤剂溶解物（NDS），而不溶解的残渣为中性洗涤纤维（NDF），这部分主要是细胞壁部分，如半纤维素，纤维素，木质素，硅酸盐和极少量的蛋白质。 酸性洗涤剂可将中性洗涤纤维（NDF）中各组分进一步分解。植物性饲料可溶于酸性洗涤剂的部分称为酸性洗涤剂溶解物（ADS），主要有中性洗涤剂溶解物（NDS）和半纤维素，剩余的残渣称为酸性洗涤纤维（ADF），其中含有纤维素、木质素和硅酸盐，此外，由中性洗涤纤维（NDF）与酸性洗涤纤维（ADF）值之差即可得到原料之中的半纤维素含量。 酸性洗涤纤维经72％硫酸的消化，则纤维素被溶解，其残渣为木质素和硅酸盐，所以，从酸性洗涤纤维（ADF）值中减去72％硫酸消化后残渣部分则为原料中纤维素的含量。 将经72％硫酸消化后的残渣灰化，灰分则为原料中的硅酸盐的含量，而在灰化中逸出的部分即为酸性洗涤木质素（ADL）的含量。 A.1.2 试剂及其制备 （1）中性洗涤剂（3％十二烷基硫酸钠） 准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠（EDTA，C16H14N2O3Na2·2H2O，化学纯，372.24）和6.8g硼酸钠（Na2B4O7·10H2O，化学纯，381.37）一同放入1000ml刻度烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加入30g十二烷基硫酸钠（C12H25NaO4S，化学纯，288.38）和10ml乙二醇乙醚（C4H10O2，化学纯，90.12）；称取4.56g无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，化学纯，141.96）置于另一烧杯中，加少量蒸馏水微微加热溶解后，倾入第一烧杯中，在容量瓶中稀释至1000ml，此溶液pH在6.9-7.1左右（pH一般不需要调整）。 （2）酸性洗涤剂（2%十六烷三甲基溴化铵） 准确称取20g十六烷三甲基溴化铵，溶于1000ml已标定过的2.0 mol·L-1硫酸溶液中，搅拌溶解，必要时过滤 （3）72％硫酸溶液 665ml H2SO4（比重1.84）加入300ml水中，冷至20℃，补加水至1000ml。 （4）无水亚硫酸钠 Na2SO3， 化学纯，126.04 （5）丙酮 CH3COCH3，化学纯，58.08 （6）仪器 分析天平（湘西分析仪器厂），抽滤瓶500ml，砂芯漏斗（3G）若干，烘箱，马福炉。 A.1.3 测定步骤 准确称取样品0.6000g置于100ml碘量瓶中，加入60ml中性洗涤剂，之后放入已沸的高压蒸汽消毒器中，100℃保温1小时，取出用3号砂芯漏斗过滤，将残渣全部转移入，残渣用水洗抽滤，并用丙酮冲洗两次。残渣在60℃下烘干称重。 把剩余残渣置于100ml碘瓶中，加入60ml 2M HCl溶液，然后放入已沸的高压消毒器中，100℃准确保温50分钟，之后用3号砂芯漏斗过滤，水洗残渣至pH 6.5－7.0。用丙酮洗两次，60℃干燥，称重。 把剩余残渣置于50ml烧杯中，加入5ml 72％硫酸，20℃水解3h，然后加水45ml，室温过夜，次日用已称恒重的3号砂芯漏斗过滤，水洗残渣至pH6.5，于60℃烘干，称重，之后在马福炉中550℃经2.5h灰化，测得灰分重量。 A.2 纤维素、半纤维素、木质素的测定