2-1微生物的实验室培养.ppt

专题2 :微生物的培养与应用;?变形虫;;细菌的结构;芽孢;微生物的代谢类型;课题一 微生物的实验室培养;　　一切微生物，都需要从外界吸收营养物质，通过代谢获取能量并合成自身的组成物质，以维持正常的生长和繁殖。;一、培养基： ;营养物质的种类 ;;;概念 常见的特殊营养物质 为什么不可缺少？;牛肉膏是用新鲜牛肉经过剔除脂肪、消化、过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。 蛋白胨用新鲜牛骨及牛肉混合提取，经过消化、过滤、浓缩、喷雾干燥而得到的一种浅黄色至类白色的干燥粉末。易溶于水，水溶液呈淡黄色。 酵母膏采用新鲜酵母乳液自溶、酶解、分离、浓缩等现代生物高新技术精制而成的一种棕黄色可溶性膏状纯天然制品。 。;1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成; 请判断下列说法的正确性;①、目的要明确 根据所培养的微生物的种类、培养的目的配制 ②、营养要协调 注意各种营养物质的浓度和比例。 ③、pH要适宜 细菌 pH6.5~7.5 真菌 pH5.0~6.0;1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成;根据物理性质分 固体培养基——微生物的分离计数,鉴定菌种 半固体培养基——观察微生物的运动, 液体培养基——常用于工业生产;是以藻类的石花菜属及制成的明胶产品，用藻类制成的琼脂是半透明、无定形的粉末、薄片或颗粒，琼脂不溶于冷水，能吸收相当本身体积20倍的水。易溶于沸水，稀释液在42℃（108 ℉）仍保持液状，但在37℃凝成紧密的胶冻。 琼脂的最有用特性是它的凝点和熔点之间的温度相差很大。它在水中需加热至95℃时才开始熔化，熔化后的溶液温度需降到40℃时才开始凝固，所以它是配制固体培养基的最好凝固剂。;固体培养基;半固体培养基：;根据化学成分分 合成培养基——成分明确,常用于分类,鉴定 天然培养基——成分不明确,常用于工业生产 （加牛肉膏、蛋白胨、酵母膏等）;选择培养基——在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长。;选择培养基;（一）微生物的结构;练习：下列是与微生物培养有关的问题，请回答：（1）某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是______，碳源是______，氮源是______．已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，帮该培养基属于______培养基．按照化学成分分类，该培养基属于______培养基．从同化作用类型看，用该培养的细菌属于______． ;二、无菌技术;1）清洁和消毒;2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 ;1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线30min消毒，照射前，可喷石炭酸或煤酚皂等消毒液加强消毒效果;1、灼烧灭菌： 接种环、接种针、试管口、瓶口 2、干热灭菌： 玻璃器皿和金属用具 3、高压蒸汽灭菌： 100kPa、121 ℃下维持15-30min.; 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？; 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手;1. 器具的灭菌 2. 培养基的配制 3. 培养基的灭菌 4. 倒平板 5. 微生物接种 6. 恒温箱中培养 7. 菌种的保存;三、实验操作之大肠杆菌的纯化培养;1．计算 2. 称量 3．溶化;5．倒平板: 待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯附近倒平板。;1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？;3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？;1. 器具的灭菌 2. 培养基的配制 3. 培养基的灭菌 4. 倒平板 5. 微生物接种 6. 恒温箱中培养 7. 菌种的保存;1、平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面. 在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落.; 单个微生物在固体培养基上大量繁殖时，会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。(一种微生物形成一种菌落。);有鞭毛细菌菌落;菌落;;思考与讨论： ①在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？;③灼烧之后为什么要等其冷却后再进行划线？;2、稀释涂布平板法;;;菌落在30-300适