高二生物选修3 动物的克隆1.ppt

第三节 动物的克隆 ;思考与回忆： 1、动物细胞全能性特点？ 随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制，分化潜能变窄。细胞核仍具有全能性。 2、能否用植物组织培养的方法使动物细胞发育成动物个体？ 不能。动物细胞和组织在体外培养的过程中，可以伴随一定的组织分化；但是不管采用什么手段和培养条件，由于细胞的运动、变化，培养物的组织成分也发生结构功能变异，结果长期的培养过程只能使单一类型的细胞保存下来，最终成了简单的细胞培养。 3、动物的细胞和组织培养的理论依据（原理）？ 细胞增殖 ;在细胞培养的过程中，结构和功能的变化;1、动物细胞、组织培养;小资料;主要有：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等;根据细胞的生理生化代谢特点,人工配制而成,为细胞提供一个近似体内生存环境,又便于控制和标准化操作 基本成分 各种碳水化合物(糖)、氨基酸、维生素、无机盐、生长因子、激素等 常用培养液 几十种;分散成单个细胞;定义 从新鲜供体取得组织细胞后在体外进行的首次培养.;细胞贴壁过程;细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止。; 定义 当原代培养的细胞处于接触抑制后, 用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个过程称传代培养.;细胞系;3、克隆培养法（细胞克隆）;动物组织培养技术的发展; 定义 指用自然或人工方法,使两个或多个不同的细胞融合成一个细胞的过程。 不同基因型的细胞之间的融合就是细胞杂交。; 诱导融合的因素 生物法：灭活的仙台病毒诱导融合 利用灭活仙台病毒是动物细胞融合所特有的。 这是由于病毒的磷脂外衣与动物细胞的膜十分相似的缘故。病毒外壳上的某些糖蛋白可能还有促进细胞融合的功能。 化学法：聚乙二醇诱导融合 因为聚乙二醇易得、简便，且融合效果稳定，是目前应用最广泛的方法。 物理法：电激、激光诱导融合;5、动物细胞融合技术的应用;人们获得抗体的传统方法是? 将抗原注入动物体,然后从动物血清中提取抗体 这种方法的缺点是什么? 效率低，产量有限，纯度低，动物抗体注入人体可能产生严重的过敏反应。 运用已学知识，设想怎样获得单一类型的抗体？ 能否用单个B淋巴细胞通过克隆形成的细胞群来产生单一类型的抗体呢？ B淋巴细胞在体外不能无限增殖。; 单克隆抗体的制备——极富创造性的方案 将能够产生特定抗体的B淋巴细胞和具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞融合在一起，形成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能在体外快速生长，又能持续分泌成分单一的特异性抗体。这种单一类型的只针对某一特定抗原决定簇的抗体分子，就是单克隆抗体。 米尔斯坦(阿根廷)和科勒(德国)因此在1984年获诺贝尔奖。;动物免疫 分离B淋巴细胞 细胞融合——淋巴细胞杂交瘤的制备 杂交瘤细胞的筛选 单克隆抗体的制备和冻存 单克隆抗体的纯化;从经抗原免疫的小 鼠中分离B淋巴细胞;1、为何要进行两次筛选？;1、单克隆抗体作为诊断试剂,在临床生化诊断、病理组织定位、体内肿瘤的定位等,与常规抗体相比,具有特异性强,灵敏度高等特点. 2、单克隆抗体上连接抗癌药物,治疗癌症等疾病(生物导弹) ;6、动物细胞全能性的表现程度;动物的基因组中，一类基因是维持??存的，在各种细胞中都处于活动的状态。另一类基因随着组织器官和发育阶段不同而选择性表达。 分化的细胞内基因的活动很不完全，因此很难像受精卵那样发挥细胞全能性。 胚胎细胞克隆比高度分化的体细胞克隆要容易得多。;8、核移植和动物的克隆;1952年，罗伯特.布里格斯 豹纹蛙→ 囊胚期细胞核→去核的同种蛙卵→发育成个体;;1.说出“多莉”的产生过程;植物细胞和动物细胞培养的比较;植物体细胞杂交和动物细胞融合得比较;动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于（ ）