吉非替尼耐药对PC9细胞中FoxO3a磷酸化影响.pdf

摘要陷，制约了该类药物的应用。生长因子信号通路的关键分子一一????秂?吉非替尼耐药对??赴?蠪???姿峄?挠跋?目的方法????，???野彼峒っ敢种萍?系统研究的耐药的??赴?!狿?／?细胞中???磷酸化水平的变化，??赴?嘌????闹瘟浦校?7翘婺??????作为抗肿瘤治疗的靶向药物是表皮生长因子受体??????????琓??械耐怀龃?恚?盏礁鞴?俅埠涂蒲械墓惴汗?注。研究表明，在?????????????，???患者中，吉非替尼可使??突变阳性患者的肿瘤灶缩小。???辍禢??临床实践指南》中已经将吉非替尼列为可一线用于??突变阳性患者化疗药物。然而，从临床研究数据显示：难以避免的获得性耐药性是临床应用中，该类药物的重要缺??转录因子通过调控靶基因发挥广泛的生理生化作用，包括影响细胞的存活、增殖、分化和??亡，在肿瘤的发生、发展和化疗敏感性等领域受到广泛重视。观察???在耐药细胞株中的磷酸化和其核转位特点与??赴?牟煌??教?其与吉非替尼耐药的关系。实验所用??赴???／?细胞均在环境条件为?。???℃、相对湿度研究生朱雅静导师温强博士乔海灵教授郑州大学基础医学院临床药理学教研室河南郑州????????????? 结果≥?％、??ǘ????．?サ南赴?嘌?淠诓⒂煤琹?ヌヅＱG宓腄??咛??甈?细胞和??疓?赴?约7翘婺岬拿舾行缘挠跋?利用???觳饷舾邢赴?關?细胞和??疓?赴?约7翘婺岬姆从π浴?绘制生长曲线，吉非替尼的浓度为??，??，?，?，????，??，??，???嵫G搴虴?对??赴?蚉?／?细胞??通路信号分子磷酸化的??窗迦?危?婧蟾?晃N扪G宓呐嘌?????藕磐?芬种萍炼訮?细胞和??疓?赴?藕欧肿恿姿峄?挠跋?为了明确各种抑制剂在???せ畹腜?细胞和??疓?赴?谛藕磐???甈?细胞和??疓?赴?蠪???瓽?核转位动力学的变化培养基传代培养。?????疞，处理时间为???影响接种??赴?蚉?／?细胞到?孔培养板，??螅?槌雠嘌???⒂?为了研究细胞中各信号分子在??盏糚?细胞和??疓?赴?辛姿峄?程度的变化，我们用??园?嵫G??蟮腜?细胞和??疓?赴??辛?不同时间和不同处理浓度的刺激过程。上述操作过程中，不同时间提取细胞蛋白，利用??????检测??信号转导通路中???痯．??痯．???和???谋泶锼?健?的影响，我们用??碳ぶ?埃?扔眯藕磐?芬种萍链?戆?嵫G宓腜?细胞和??疓?赴??肳?????检测???痯．??痯．???和???谋泶?水平。???的磷酸化与其在细胞中的定位有密切关系，同时还直接反映其转录功能发挥的情况。为研究其亚细胞定位在??碳は略赑?细胞和??疓??胞中的区别，我们应用表达??瓼???诤系鞍椎闹柿ＷH綪?细胞和??疓?赴??⑼ü??嵫G濉??刺激和吉非替尼处理系统研究???在??赴?蚉?／?细胞中核转位的规律。??7翘婺崮鸵┒訮?细胞株生物学的影响倒置相差显微镜观察??蚉?／?细胞形态学的变化，并使用??软件进行测量和处理，二者在形态学方面未见明显变化。摘要? 嵫G蹇梢允筆?细胞和??疓?赴?行藕欧肿覣?／?阱???牧?结论经基因检测，??赴?蚉?／?细胞均未发生???槐洹???赴?蚉?／?细胞均随吉非替尼的浓度增加而死亡率增加。??疓??胞与??赴?啾龋?约7翘婺嵊懈?叩哪褪艹潭取???直鹞#??甈?细胞和??疓?赴?藕磐?返姆从π??甈?细胞和??疓?赴?蠪????邪?剩?俗N淮┧蟮奶氐?在??赴?蚉?／?细胞中，???．??植加诎?实闹邢赴?壤?姘?????????????／????随剥夺血清的时间延长???痯??／?????赑?细胞和??疓?赴?中的表达量均逐渐降低，在???贝锏交?咚?健５玃?细胞中的信号分子磷酸化程度下降速度快于??疓?赴??????痬?????可使??赴?蚉?／?细胞中??疎?／???的磷酸化达到峰值。??的特异性抑制剂????、??奶匾煨砸种萍罰???在???激的??赴?蚉?／?细胞中抑制了相关信号分子的磷酸化水平。经?????巳旧ǘ哉眨??嵫G??梢允笷???N蝗牒耍?鳨?刺激???墒笷???匦路植加诎?手小?吉非替尼可以抑制??盏嫉腇???狦?蛋白从胞核向胞质的分布，使???持续保持在细胞核内浓集的状态。夺血清的时间延长而延长，并随???淼氖奔溲映ぴ黾佣??撸?在??疓?赴?校珽?处理???苫?净指碏???瓽?在胞质中分布比例至剥夺血清前水平；而在??赴?校珽?处理???荒芑指碏???瓽?在胞质中分布比例到剥夺血清前水平??．????甈?细胞和??疓?赴?谛翁?Ш湍鸵┫喙氐闹饕;?蛭坏憔?捶⑸?谋洌???7翘婺岫訮?／?细胞的??高于??赴??摘要??／???／?? 关键词：??籉???患7翘婺幔籈??恢琢瞿鸵?酸化水平呈时间依赖性的减弱，并使?