铅对星形胶质细胞调控突触形成与神经元内信息传递的影响.pdfVIP

录目一、摘要中文论著摘要??????????????????????????英文论著摘要??????????????????????????二、英文缩略语???????????????????????????三、论文前言??????????????????????????????材料与方法???????????????????????????实验结果????????????????????????????讨论??????????????????????????????结论??????????????????????????????四、本研究创新性的自我评价?????????????????????五、参考文献????????????????????????????六、附录综述??????????????????????????????在学期间科研成绩????????????????????????致谢??????????????????????????????个人简介????????????????????????????月?唷?????????????????????????????? 铅对星形胶质细胞调控突触形成和神经元内信息传递的影响方法·中文论著摘要·?????嘌?癆?的制备刖铅是一种常见的职业与环境污染物，具有显著神经毒性作用，可造成学习记经元。另外，研究发现?是铅的“储藏池”。因此，我们有理由推测?可能是揭示铅损害学习记忆功能的机制提供新的研究方向和实验数据。置忆的损伤。迄今，铅损害学习记忆方面的研究虽然取得了一些进展，但具体机制仍不十分清楚，还有待进一步的研究。脑的高级神经活动是由相互作用的神经元一胶质细胞网络共同参与调控的。星形胶质细胞?????，??悄宰橹?谑?孔疃嗪头植甲罟愕纳窬?褐氏赴??其对神经元的发育和迁移、突触的形成、递质传递的调节以及内、外环境的稳定等都起着十分重要的作用。脑组织超微结构显示，?与毛细血管内皮细胞、基膜和周细胞等共同构成血一脑屏障，血液中的外来化学物质必须通过?才能进入神铅在脑组织中初始损伤的靶细胞。研究显示，?能够通过分泌胶质源性神经调质影响突触前膜神经递质的释放和突触后膜的受体反应，进而调节突触可塑性。如果?是铅损伤的初始靶细胞，那么其功能异常能否引起突触形成及神经元信号转导的异常昵?综上所述，本实验以神经元．胶质细胞网络为研究主线，以原代培养的?和神经元为试验对象，探讨?内铅能否对突触形成与神经元内信息传递产生影响，为取出生??天???大鼠仔鼠，消毒后，断头取大脑皮质，剪碎、胰酶消化结合机械吹打使细胞分散，将细胞悬液接种在玻璃培养皿中，差速粘附处理去除成纤维细胞，将未粘附的细胞悬液接种在培养瓶中。??染色鉴定细胞纯度。纯化?形成单层，换成含铅浓度为?????矛????／?呐嘌?海?嘌? ⑸窬?5呐嘌?氪炕??⑸窬?7肿橛氪???⒓觳庵副暧敕椒??⑼臣品治??ＧΡ┞逗螅??嘌?海?怀珊?和???／?劝彼岬南赴?庖海?饔??弃去培养基，换成无血清培养液，继续培养???占?赴?嘌?海?胄墓?耍??成?条件培养液，保存备用。取新生???大鼠仔鼠，分离大脑皮质，剪碎后胰酶消化，过滤，离心，加入含?％胎牛血清的??培养液制成细胞悬液，接种培养??；籒????????并加入阿糖胞苷，培养??蟀肓炕灰海?绦?嘌???匾煨韵┐蓟??染色鉴定细胞纯度。将原代培养的神经元随机分为纯培养组???嘌?窬?2患尤階??⒎???盏嫉腁?处理组、??盏?无铅暴露??处理组和?、????铅暴露的???碜椤＜尤階?时弃去神经元纯培养体系中??的培养液，新加培养液由??蚇????????按??构成。????蚇?免疫荧光染色鉴定?和神经元??怪孟晕⒕倒鄄烨Ρ┞禔?赴?翁?吧?ぷ刺?⒉杉?枷?????????觳庀赴?盍???怪孟晕⒕倒鄄觳煌珹?处理的神经元细胞形态并采集图像?????????法检测神经元??鞍妆泶???淮ニ孛庖哂ü馑ū晗赴???旧ü鄄旌焐?ü饪帕Ｊ???法检测????????????和?蛋白的表达实验数据采用???．??型臣品治觥６嘧榧浔冉喜捎玫ヒ蛩胤讲罘治??????榧淞搅奖冉喜捎胵检验???Ｒ訮?．?作为差异有统计学意义的判定标准。??／????? 钴木???肷窬?C庖哂ü饧???⑶Ρ┞逗驛?翁?鄄??⒉煌?亮壳Ρ┞抖訟?盍Φ挠跋??⒉煌珹?处理后神经元形态观察?⑶Ρ┞禔?亩陨窬?D赟?蛋白表达的影响?⑼淮ニ赜ü馊旧ü鄄焱淮バ纬?里??免疫荧光反应阳性细胞为?，其胞浆呈红色；??庖哂ü夥从ρ粜韵?胞为神经元，胞浆被染成绿色，经计数神经元纯度大于?％，可以进行下一步实验研究。?和???畉??疞铅暴露组?形态与对照组相比未见明显改变，而??铅暴露组的少量细胞开始脱壁，细胞间隙增大；随铅暴露浓度的增加，