杀虫剂诱导褐飞虱再猖獗的生理生化和分子机制研究.pdf

2 一 倍；交配后雌虫Nlvg基因表水平与对照相比分别增加了4．1，5．4和6．0倍。三唑磷处理的 褐飞虱在交配前后雌虫Nlvg基因表达水平显著高于溴氰菊酯处理。然而，两种杀虫剂处理 的褐飞虱交配前显著抑制雌虫Nljhe基因表达；交配后却显著诱导Nljhe基因表达，并且表 达水平随杀虫剂浓度的增加而增加。褐飞虱在交配前后雌虫JHIII含量随杀虫剂浓度的增 加而增加。然而，褐飞虱在交配前雄虫JHIII含量显著增加，交配后JI-IIII含量却显著下降， 表明褐飞虱雄虫JHIII经交配传递给了雌虫。交配前后，溴氰菊酯浓度与褐飞虱雌雄虫JHIII 含量呈显著线性回归关系，三唑磷浓度与褐飞虱雌雄虫JHIII含量呈显著抛物线关系。 3．杀虫剂处理对褐飞虱雄虫的生殖及其交配传导效应的影响 褐飞虱是一种通过雌雄交配产生后代的害虫，也是一种典型的杀虫剂诱导再猖獗型害 虫。以前研究杀虫剂诱导害虫再猖獗机制主要集中在生态学方面和刺激雌虫生殖。然而， 杀虫剂亚致死剂量诱导雄虫在再猖獗中的生殖效应尚未有报道。本文研究目的是试图阐明 杀虫剂亚致死剂量处理的褐飞虱雌雄虫不同交配组合对雄虫附腺蛋白含量的影响及经交 配对雌虫脂肪体和卵巢卵黄蛋白含量的影响。结果表明雄虫附腺蛋白含量受交配状态、杀 虫剂类型和杀虫剂浓度影响。杀虫剂处理的褐飞虱在交配前雄虫附腺蛋白含量显著增加， 交配后雄虫附腺蛋白含量显著减少，表明经交配雄虫附腺蛋白传递给了雌虫。相互交配实 验表明处理的雄虫与处理的雌虫交配 ×早。 组合褐飞虱脂肪体和卵巢的卵黄蛋白含量在 所有交配组合中最高，未处理的雄虫与处理的雌虫交配 毋：Ⅸ、早。 组合显著高于处理的雄虫 与未处理的雌虫交配 艿t×早。k 组合。本文结果表明1 杀虫剂对雄虫生殖有显著影响；2 处理的雄虫把更多的附腺蛋白传递给了雌虫；3 处理的雄虫与处理的雌虫交配组合对雌 虫生殖的影响最大。 4．杀虫剂诱导及交配效应的褐飞虱蛋白质组学分析 以前研究证明三唑磷亚致死剂量处理的褐飞虱雄虫附腺蛋白含量显著增加，经交配后 影响雌虫的生殖。然而，杀虫剂亚致死剂量诱导雄虫附腺蛋白种类的变化和刺激雌虫生殖 的机制并不清楚。为鉴定雄虫附腺蛋白种类的变化和交配后对雌虫生殖的影响，本文采用 双向电泳和LC．MS／MS的方法对以下6组样品 未处理未交配的雄虫，处理未交配的雄虫， 处理交配的雄虫，未处理未交配的雌虫，处理未交配的雌虫，处理交配的雌虫 分为不同 的4组进行蛋白质组学分析： 1 未处理未交配的雄虫和处理未交配的雄虫； 2 处理未 交配的雄虫和处理交配的雄虫； 3 未处理未交配的雌虫和处理未交配的雌虫； 4 处理 未交配的雌虫和处理交配的雌虫。每组胶大约有500．600个蛋白点，4组样品共有107个 差异蛋白，通过LC．MS／MS鉴定了表达量增加了2倍以上的63个蛋白，38个蛋白上调， 25个蛋白下调，包括发现一些新的与生殖相关的蛋白，如精子形成相关蛋白5，PHD指蛋 些蛋白的功能还需进一步研究。 5．杀虫剂处理对褐飞虱雌虫海藻糖能量代谢的影响 以前研究证明了三唑磷亚致死剂量处理的褐飞虱成虫飞行能力显著增强。然而，褐飞 虱成虫飞行能力增强的生理生化和分子机制并不清楚。海藻糖是昆虫血淋巴中一种主要的 血糖，海藻糖酶活性涉及其能量代谢的过程。本文研究了三唑磷亚致死剂量处理的褐飞虱 5龄若虫和长短翅雌虫海藻糖含量、海藻糖酶活性 可溶性海藻糖酶和膜结合型海藻糖酶 若虫和长短翅雌虫海藻糖含量显著低于对照，葡萄糖含量、可溶性海藻糖酶活性和相对的 雌虫可溶性海藻糖酶活性和NITre—J基因表达水平显著高于短翅雌虫。 关键词：褐飞虱，杀虫剂，能量代谢，海藻糖酶基因，卵黄原蛋白基因，保幼激素酯酶 基因，双向电泳，蛋白质组学，分子机制 4 一 on andMolecularMechanismsof StudyPhysiological，Biochemical insecticide-—induced ResurgenceofNilaparvata Delphacidae Abstract The a brown planthopper SPH ，Nilaparvata ofriceinthe ofAsia．Itisalsoa recurrentinduced serious regions typical pest by pest tropical havefocusedmoreon of aspectspest pesticides．Thepreviousinvestigations ecological andmolecularmechanismseffectsofthe resurge