丹参素与丹酚酸B对骨髓基质干细胞成脂分化与成骨分化过程的Wntβcatenin通路的影响及其抗骨质疏松机制的探讨.pdfVIP

物酶增殖体激活受体丫??脚??驛的影响，判断药物对骨髓基质干细胞成?笫蠊撬杌?矢上赴?逋馀嘌?诔晒怯氤芍?只?盏枷碌膚?#甤???信组，药物作用后检测细胞?????训?疉与?甤????Ⅲ?谋泶铩Ｌ教值?参素与丹酚酸?欠裢ü?鹘赪“?甤???信号通路影响大鼠骨髓基质干细胞二日木观察不同浓度的丹参素与丹酚酸?怨撬杌?矢上赴?芍?只?始肮?趸?脂分化能力的影响。检测碱性磷酸酶的活性以及?????的表达以判断药物对骨髓基质干细胞成骨分化能力的影响。并观察丹参素与丹酚酸?饔玫牧啃?关系和找出它们在实验中的最佳作用浓度。号通路的调节通过传代贴壁筛选的方法分离纯化骨髓基质干细胞，分别进行成脂诱导与成骨诱导。应用??藕磐?稰?芯片检测骨髓基质干细胞在成脂分化与成骨分化诱导后??藕磐揪断喙鼗?虮泶铮?苑治龊脱罢矣牍撬杌?矢上赴?ㄏ蚍?化相关的靶基因。?げ嗡赜氲し铀酈对调控大鼠骨髓基质干细胞分化的?“?甤???信号通路关键基因??‘?畂??与?????挠跋?选用纯化的大鼠骨髓基质干细胞，把细胞分成：阴性对照组、成脂诱导组、成骨诱导组、成脂诱导?げ嗡刈椤⒊芍?盏?丹酚酸?椋?げ嗡刈椋?し铀酈分化方向。?笫蠊撬杌?矢上赴?逋馀嘌?俺晒怯氤芍?只?募??通过传代贴壁筛选的方法分离纯化得到较为均一成纤维细胞型的骨髓基质细胞。成骨诱导?筇旒钚粤姿崦溉旧ǔ恃粜裕??旌蠊墙峤谲缢睾烊旧ǔ恃?性；成脂诱导后出现个体增大的脂肪细胞，其脂滴可被油红?疚:焐āＫ得?分离的细胞具有干细胞特性，并能被定向诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞，可用于检测药物的作用。?げ嗡赜氲し铀酈对大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞与脂肪细胞分化的影响：骨髓基质干细胞用成骨诱导剂干预后碱性磷酸酶的表达较未诱导组明显增勿士申? 表达均比脂肪诱导组明显减少，而?甤??T虮戎?居盏甲槊飨栽?加??．??３晒欠只?墓丶??騌???輀矾?泶镆步衔从盏甲槊飨栽龆唷?与?鲁６哉兆樽橄啾龋??茉黾覴???Ⅲ?谋泶铮?缘げ嗡刈饔妹飨浴Ｌ砑?化学比色值??．??癙?脚?斟?谋泶锝险?６哉兆槊飨栽黾印３芍???刁??疞丹酚酸??芗跎貾?脚?矾?谋泶铮?缘げ嗡刈饔妹飨浴???。其中脂肪诱导组????必?泶锝隙哉兆槊飨栽龈撸琾．????丹参素各个浓度在?焓蔽薮俳?赴?泶锛钚粤姿崦傅淖饔谩Ｅǘ任??羖????疞，?????疞的丹参素与正常对照组相比，在第?欤?天能升高??幕钚?尸?．??５し铀酈浓度为?击??疞与?。??／?庇写俳?撬杌?质干细胞分泌碱性磷酸酶的作用，该作用在药物作用第三天时出现，第?旌偷??焓弊蠲飨?????。浓度为??????疞月．参素与浓度为?。??／?し铀酈脂肪诱导剂后???只?V?鞠赴?哪芰Ρ日?６哉兆槊飨约忧俊Ｓ秃烊旧?导加药组的成脂分化率比脂肪诱导组减少但差别无统计学意义?????，但随着时间的延长比色值并未明显增加。浓度为?羖?髆?／?げ嗡赜肱ǘ任??笫蠊撬杌?矢上赴?逋馀嘌?诔晒怯氤芍?只?盏枷碌腤?／肛．?????号通路的调节通过传代贴壁筛选的方法分离纯化得到较为均一骨髓基质干细胞。经诱导后可向成骨细胞和脂肪细胞方向分化。在??藕磐???鱿喙鼗?蛑校?胛从?导组相比，骨髓基质干细胞成脂诱导后??藕磐?繁泶锷系鞯幕????．?????、??????????，下调的基因???，?甤???，??，?????个????．?。成骨诱导后??藕磐?繁泶锷系鞯幕????，?譵?，?甤???，???个??????泶锵碌鞯幕???印?瑂?冲?現??等?个?げ嗡赜氲し铀酈对调控大鼠骨髓基质干细胞分化的?“?甤???信号通路关键基因???????与?甤?????的影响。对照组、诱导组、和给药组的大鼠骨髓基质干细胞均能表达?????与?甤???则较对照组明显下降。成骨诱导组则相反：?????隙哉兆楸泶锩飨越档停??甤????则较对照组明显增多。脂肪诱导?げ嗡刈椤⒅?居盏?丹酚酸?榈?多。丹参素组、丹酚酸?楸泶锏腄????比正常组少，同时丹参素组?甤????????．?。 结论关键词酸??笔怪?痉只?墓丶??騊?脚?喇?泶锛跎伲?苁怪?鞠赴??渭?丹参素通过减少?輕．????藕磐?分械腄???????的表达，增加?Ⅲ?谋泶铮?鹘诖笫蠊撬杌?矢上赴?虺晒窍赴?只??跎倨湎?过影响?軩．????藕磐?返幕?品⒒涌构侵适杷傻淖饔谩??緋????信号通路??判腎??的表达比正常组多，但丹酚酸?閜．????谋泶锉日?Ｗ樯佟??げ嗡赜氲し铀酈均可促进大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞分化，增加??的碱性磷酸酶活性，增加成骨分化关键基因?逫????谋泶铩５げ嗡睾偷し?少。但不能减少脂肪细胞的数目。?笫蠊撬杌?矢上赴?诔晒欠只?氤芍?只??讨兄饕S跋靪?／?甤???信号通路中的??????颉??甤???脂肪细胞分化。丹酚酸?蛑饕Mü?跋霥??