遗传学实验指导Lite校.docVIP

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PAGE  PAGE 14 动物遗传学实验指导 第一部分  遗传学的基本规律实验 实验一  果蝇生活史和性状观察…………………………………1 实验二  一对因子遗传与伴性遗传………………………………5 实验三  果蝇的三点测交试验……………………………………9 南 京 农 业 大 学 动 物 科 技 学 院 二○○五年 实验一 果蝇的培养和性状观察 一、概述 果蝇(fruit fly)是双翅目(Didtera)昆虫,属果蝇属(genus prosophila)。约有九百多个种。 用果蝇作为实验材料有许多优点: 饲养容易,在常温下,以玉米粉等作饲料就可以生长、繁殖; 生长迅速,12天左右就可完成一个世代。每个受精的雌蝇可产卵400~500个,因此在短时间内就可以获得大量的子代,便于遗传学分析; 染色体数少,只有4对; 唾腺染色体制作容易,横纹清晰,???细胞学观察的好材料; 突变性状多,而且多数是形态突变,便于观察。 二、果蝇的生活史 果蝇的生活周期长短与温度有密切关系。一般来说,30℃以上温度能使果蝇不育死亡,低温能使生活周期延长,生活力下降。饲养果蝇的最适温度为20~25℃。 果蝇在25℃时,从卵到成蝇需10天左右。成虫可活20~33天。 果蝇的生活史:见表1-1和图1-1 表1-1 果蝇的生活周期与饲养温度间的关系 10℃15℃20℃25℃卵→幼虫8天5天幼虫→成虫57天18天6天4天 减数分裂 雄性果蝇 精子 雌性果蝇 卵子 第一批成虫 产第一批卵 (第八天)   蛹 第一批卵孵化   (第四天)                    (第零天) 第二次蜕皮                            幼虫 第一天蜕皮 (第一天) 图1-1 果蝇的生活周期和各发育阶段经过的时间 三、果蝇性别及突变性状的鉴别 1 雌雄果蝇的鉴别 果蝇的每一体细胞有8条染色体(2n=8),可配成4对。其中3对在雌雄果蝇中是一样的,称常染色体,另外一对称性染色体。在雌果蝇中是XX,在雄性果蝇中是XY。 果蝇的雌雄在幼虫期较难区别,但到了成虫期区别相当容易(图1-2)。雄性个体一般较雌性个体小,腹部环纹3条,腹尖颜色深,第一对脚的跗节前端表面有黑色鬃毛流梳,称性梳(sex cumbs)(见图l-3)。雌性环纹5条,腹尖色浅,无性梳。 性梳        图1-2 果蝇的雄、雌个体          图1-3 雄性果蝇的性梳 2 果蝇突变性状的鉴别 实验中选用的果蝇突变性状一般都可用肉眼鉴定,而另一些性状可在解剖镜下鉴定,如焦刚毛与直刚毛等。现列表如下: 表1—2实验中使用的果蝇突变品系 影响部分突变名称基因符号染色体上座位翅 眼色 体色 刚毛 翅形残翅 白眼 黑檀体 焦刚毛 小翅Vg w e sn3 mⅡR67.0 X1.5 ⅢR70.7 X21.0 X36.1四、果蝇的实验用品和实验技术 果蝇的实验用品较简单。常用的是,恒温箱、解剖镜,指管,白瓷板,海棉垫,麻醉瓶,毛笔,毛边纸,镊子,消毒锅等。 这里仅就麻醉瓶作一简单介绍。麻醉瓶形状如图1-4。 棉球(滴乙醚用) 大木塞(或棉花塞)                 图1-4 麻醉瓶 如这种麻醉瓶难以得到,也可用广口瓶代用,在广口瓶上加木塞,木塞内钉一个用纱布包的棉球,乙醚滴在棉球上。 在做果蝇的实验之前,要先将镊子、白瓷板用酒精棉擦净,毛笔尖要用手揉软(不能用水泡软。要保持笔尖干燥)。 1 麻醉 对果蝇进行检查时,用乙醚麻醉,使果蝇处于昏迷状态。使用时将乙醚(2—3滴)滴到麻醉瓶的棉花球上(注意不要让乙醚流进瓶内)。麻醉瓶要保持干燥,否则会粘住果蝇翅膀,影响观察。麻醉果蝇时,先将长有果蝇的培养瓶在海棉垫上敲,使果蝇全部震落在培养瓶底部。然后迅速打开培养瓶的棉塞,把果蝇倒入去盖的麻醉瓶中,并立即盖好麻醉瓶。待果蝇全部昏迷后,倒在自瓷板上进行观察。 果蝇的麻醉程度看实验要求而定。对仍须培养的果蝇以轻度麻醉为宜;但对不再培养,单单进行性状观察的果蝇,可以深度麻醉,甚而致死也无妨(果蝇翅膀外展45°角,说明已死亡)。检查完毕后,把不需要的果蝇倒入盛有煤油或酒精的瓶中(死蝇盛留器)。 2 果蝇交配 将雌雄果蝇放在一起培养。雌蝇的生殖器官中有贮精囊,可保留交配所得的大量精子。雌蝇一次交配所得的精子,足够它多次排出的卵受精。因此在做杂交试验时,雌蝇必须选用处女蝇(没有交配过的雌蝇)。雌蝇孵出后12小时内不会交

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