吉林大学食品生物化学5酶研究资料.ppt

;;定义: 酶(Enzyme)是生物体活细胞产生的具有特殊催化活性和特定空间构象的生物大分子，包括蛋白质及核酸，又称为生物催化剂。;活化能：分子由常态转变为活化状态所需的能量。是指在一定温度下，1mol 反应物全部进入活化状态所需的自由能。;;;第三节 酶的命名和分类 每种酶都有两个名字：习惯名称和系统名称。 一．习惯命名法： 二．国际系统命名法： ;;乙醇脱氢酶的编码是： EC1.1.1.1 第一个“1”—— 第1大类，即氧化还原酶类； 第二个“1”—— 第1亚类，供氢体为CHOH； 第三个“1”—— 第1亚亚类，受氢体为NAD+； 第四个“1”—— 在亚亚类中的顺序号。; 国际酶学委员会（Enzyme Commission, EC）将所有的酶按它们所催化的反应的性质分为六大类。; 国际酶学委员会（Enzyme Commission, EC）将所有的酶按它们所催化的反应的性质分为六大类。;;;;;;;1. “锁与钥匙”学说：;2. “诱导契合”假说 ;;一．酶活力的测定： 1．酶活力（活性）： 2．酶的活力单位： 定义： 国际单位（IU）（1961年）： 在最适反应条件（25℃）下，每分钟内催化 1μmol底物转化为产物所需的酶量定为一个酶活力单位，即1 IU = 1μmol / min。 Katal（Kat）单位： 在最适条件下，每秒钟能催化1mol底物转化为产物所需的酶量为1 Kat单位（1Kat = 1mol / S）。 1Kat= 60×106 IU， 1IU = 16.7 nKat。;3．酶的比活力： 每mg蛋白质所含的酶活力。表示酶的纯度，也表示单位质量蛋白质的催化能力。 比活力 = U / mg蛋白 = 总活力U / 总蛋白mg 4．酶活力的测定方法： （1）分光光度法： （2）荧光法： （3）同位素测定法： （4）电化学法：;;第一节 底物浓度对酶促反应速率的影响 ; 为了要解释这一现象， 1903年由Henri和Wurtz提出了中间络合物学说：当酶催化某一化学反应时，酶首先与底物结合生成中间复合物（ES），然后生成产物（P），并释放出酶： ;（1）当底物浓度小时，酶未被底物饱和，反应速率取快于底物浓度，为一级反应； （2）底物浓度变大，ES生成较多，反应速率取快于ES的浓度，为混合级反应； （3）当底物浓度相当高时，酶全部被底物饱和，反应速度不会因底物浓度增加而提高，反应为0级。 ; Michaelis Menten推导米氏方程。 ;[E]?酶总量；[Et]?反应后t时的酶量； [ES]?中间产物浓度;(2)反应体系处于稳态 ;;刚反应时，若形成的速度为v,则 v1?k1 [Et][S] ? k1[（E）-（ES）][S] (1);ES的生成量 = ES的分解量 即： v1 =v23 k1[（E）-（ES）][S] = [ES] （k2? k3） [（E）-（ES）][S]/ [ES] = （k2? k3）/ k1 (3) 设 Km=(k2+k3)/k1 将(3)重排得 [ES] =[E][S]/ Km ? [S] (4);[S] [E] [E] =[ES], Vmax = K3[ES]= K3[E] （7） 将（7）式代入（6）式;Km—米氏常数，当酶反应速率达到最大反应速率一半时的底物浓度，单位：mol/L； Km= (k2+k3)/k1 Km是酶的特征常数，近似表示酶与底物的亲和力。 （1）当[S]《Km时，反应速率与底物浓度成正比，v与[S]的关系符合一级动力学。酶没有全部被底物所饱和。 （2）当[S]》Km时，反应速率已达到最大速率，这时酶全部被底物所饱和，v与[S]无关，符合0级动力学，只有在此条件下才能正确测得酶活力。 （3）当[S]=Km时，反应速率为最大速率的一半，因此Km就代表反应速率达到最大反应速率一半时的底物浓度。 ; Km = [S] ; 2.动力学参数的意义;（3）kcat/Km的意义：在生理条件下，大多数酶并不被底物所饱和，在体内[S]/Km的比值通常介于0.01-1.0之间。 Vmax=kcat[ET] 当[S]Km时， [E]=[ET] v?(kcat/Km) · [E][S] kcat/Km= k1·k3/ (k2+k3) 上限为k1 kcat/Km表示酶的催化效率。;ES的生成量 = ES的分解量 即： v1 =v23 k1[（E）-（ES）][S] = [ES] （k2? k3） [（E）-（ES