基因诊断与基因治疗答案.pptVIP

　基因诊断与基因治疗;基因变异疾病类型;第一节基因诊断;基因诊断的特点： (1)　针对性强、特异性高； (2)　取材用量少，而来源广，灵敏度高； 　　血液、尿液和羊水脱落细胞及头发等都可以用于检测。由于基因体外扩增技术的发展，标本只需微量，目的基因只需pg水平。 (3)　适应性强，检测范围广。 ; 基因探针的来源种类较广，检测目的可为一个特定基因，亦可为一种特定的基因组，可为内源基因亦可为外源基因。 　　 据调查数据，截至2006年4月1日，中国各类残疾人总数达8296万人，残疾人占全国总人口的比例为6.34％。其中相当数量的是先天畸形和遗传性疾病。开展这些疾病的产前诊断，杜绝患儿出生，降低发病率，具有重大意义。 ;二、基因诊断的途径、技术和方法;１、基因突变的检测 　　 致病基因的某些突变类型与发病具有直接的因果关系，检测这种基因突变作为诊断依据是最理想的途径。;２、基因连锁分析 　　 由于致病基因可在任何位点上产生突变，致使同一种疾病有不同的突变类型。可采用基因连锁分析。 　　 同一条染色体上相邻近的基因一起被遗传称为基因连锁，可以作为遗传标志。 　　 连锁分析主要是应用DNA限制酶片段长度多态性（RFLP）位点的不断发现和定位。;３、mRNA的检测 　　 从基因水平上提供基因功能是否正常的直接证据。;（二）基因诊断的常用技术方法;核酸分子杂交技术;聚合酶链反应 (PCR);PCR/SSCP;基因测序;RNA诊断;基因芯片;三、基因诊断的应用;（一）遗传疾病的基因诊断 由于基因发生突变或畸变所引起的一些可以传给子代的疾病称为遗传病。 由基因组某单个基因座上存在疾病基因所引起的遗传病称为单基因遗传病。 由多个基因座存在有致病基因，并共同作用，有时还需要一定的环境因素参与才导致个体发病，这类疾病称为多基因遗传病。;诊断方法： 　 (1)致病基因已经完全了解或部分了解，分子病理学完全清楚或部分清楚，可应用限制酶图谱法或寡核苷酸探针直接分析基因内的缺陷； 　 (2)已经知道致病基因及其部分结构，获得了基因探针，但对分子病理学了解较少或不了解，或者是过于复杂，可以应用基因探针进行RFLP的连锁分析； 　 (3)对致病基因尚一无所知或知道的很少，则主要是依靠基因外与其紧密连锁的RFLP进行间接分析。 ;１、点杂交法诊断α-地中海贫血 　　地中海贫血是世界上最常见和发生率最高的一种单基因遗传病。 　　地贫分为两类： 　　　α-地贫：α-链缺失，出现β４　 　　　β-地贫：β-链缺失，出现α４ 　　方法是将患者白细胞DNA或产妇的羊水细胞DNA用α-链的基因探针进行点杂交。以正常人为对照，观察放射自显影的强度，可初步诊断α地贫。;２、采用Southern印迹法进行产前诊断 ３、限制性酶谱分析法诊断镰刀状细胞贫血 ４、苯丙酮酸尿症的限制性片段长度多态性（RFLP）分析;（二）恶性肿瘤的基因诊断 　　肿瘤的发生和发展与癌基因和抑癌基因密切相关。 基因分析表明恶性肿瘤有两种类型的变化： 　(1)肿瘤细胞甚至癌前细胞中某些基因发生了结构或位置上的改变，导致基因表达产物在质、量和表型上的变异，常有某种明显的标志。 　(2)肿瘤细胞与正常细胞相比，结构基因并无差异，但在表达水平和调控水平上发生了改变。; 肿瘤的基因分析可根据不同的目的进行基因结构或基因表达的基因分析。 　肿瘤基因分析的应用： 　(1)　直接用于肿瘤的诊断，特别是早期诊断； 　(2)　对癌症进行更准确的分类、分期和预后估计； 　(3)　更精确地鉴别癌前病变； 　(4)　对癌进行定位、大小和扩散的检测； 　(5)　对癌易感者和具有癌遗传倾向的个体进行监测；　 　(6)　发现特异基因产物并用于制订特殊治疗方法和方案等。 ; 人类肿瘤中，进行基因诊断最成功的例子是淋巴样肿瘤。运用淋巴细胞抗原受体基因发生重排进行基因诊断。 ;（三）病原体的基因诊断 　　人类免疫缺陷病毒（HIV）的基因诊断以原位核酸杂交（ISH）和PCR技术应用较广。 　　 感染性疾病采用DNA诊断的基本前提： 　(1)　病原体基因组DNA具有特异的序列； 　(2)　能将此特异DNA序列制备成特定的探针。;　例：ISH检测HIV：;诊断由疟原虫感染所致恶性疟疾：;（四）多基因病的基因诊断 　　与单基因病相比较，多基因病涉及基因数量多，情况更复杂，如高血压、冠心病和精神性疾病等。 　　多基因病的基因诊断要搞清参与发病的致病基因在染色体上的位置。近年来采用RFLP连锁分析已对这些疾病进行了研究。;（五）基因诊断的其它应用 　 基因诊断技术还在其它许多方面发挥着作用。 　　如： 斑点杂交法对人性别的测定， DNA指纹图进行亲子鉴定， 法医学鉴定等。;第二