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PAGE  课程设计报告 设计课题 柿叶总皂苷的提取工艺研究 学生姓名： 王日标 学号： 110303130 专业班级： 生物技术111 指导教师： 林国荣 环境与生命科学系制 2014年11月 目 录 1. 设计目的与要求3 2. 设计正文3 3. 设计总结8  PAGE 9 柿叶总皂苷的提取工艺研究 1设计目的与要求 1.1 目的 柿叶为柿树科(Ebenaceae)柿树属(Diospyros)植物柿(Diospyros kaki L.f.)的新鲜或干燥叶。全世界柿树有6属450余种，其中我国有2属50多种。我国是世界上最主要的柿树生产国，占世界总产量的50%以上。柿叶具有较高的营养价值和医疗保健作用，柿叶含有丰富的维C、芦丁、胆碱、黄酮苷、 胡萝卜素、多种氨基酸及铁、锌、钙等对人体健康有益的营养成分；据测定，每百克柿叶中含有蛋白质11.05g、脂肪6.84g、糖 类54.84mg、维C704mg、胆碱317mg、芦丁121.34mg，其中尤以维生素C含量为多，比一般水果高几倍到几十倍[1]。柿叶具有抗菌消炎、生津止渴、清热解毒、润肺强心、 镇咳止血、抗癌防癌等多种医疗保健功能[2]。 柿叶中含有黄酮类、皂苷类、香豆素类、多糖等多种化学成分。其中皂苷广泛分布于自然界，主要包括三萜皂苷和甾体皂苷两种。其中，三萜皂苷在豆科、五加科、葫芦科、毛茛科、石竹科、伞形科、鼠李科、报春花科等植物分布较多。而甾体皂苷主要分布在薯蓣科、百合科、玄参科、菝葜科、龙舌兰科植物中。柿叶中含有多种三萜类化合物；从柿叶中分离鉴定的三萜类化合物有乌苏醇、乌苏酸、齐墩果酸、白桦脂酸、19α-羟基乌苏酸、19α，2、4-二羟基乌苏酸、熊果苷等[3]。 皂苷是一类较复杂的苷类化合物，与水混合振摇时产生持久性的似肥皂泡沫状物。由于皂苷具有多种多样的生理活性和药理作用。如降血脂，抗衰老，增强机体免疫力，消炎、抗病毒、抗肿瘤抗炎、抗菌、抗病毒、降低胆固醇和免疫调节等功能。因此，皂苷的分离提取目前成为人们研究的热点之一。 由于皂苷提取物往往被认为有效成分含量低、杂质多、质量不稳定，用药多建立在经验的基础上，难以与现代医学接轨。为解决这个问题，研究并优化皂苷的分离与纯化工艺十分必要。 1.2 要求 做本次试验的学生应具备有机化学及实验、现代生物学基础及实验、植物生理学及实验、生物化学及实验、生化工程、仪器分析以及生物技术实验等基础知识和专业知识。在实验过程中使用单因素试验法和正交试验法进行实验；并最终得出最佳提取柿叶总皂苷的条件进行提取柿叶中的总皂苷，并在OD580nm下测定其吸光值。 2 单因素试验 在我们对柿叶总皂苷的提取工艺进行研究时，同样也借鉴了诸多前人的经验。周跃华等[4]采用色谱法对麦冬总皂苷进行提取；主要对溶媒（水、乙醇）进行比较；还有对麦冬总皂苷提取的影响因素，主要有提取次数、药材粒度等进行比较；得出最佳提取条件为用5～10目的药材，提取3次，每次1h，基本能提尽麦冬皂苷。 我们的课程设计为《柿叶总皂苷的提取工艺研究》，主要采用单因素试验，考察超声波辅助提取、水和乙醇提取对柿叶中总皂苷提取率的影响；同时采用正交设计试验，考察固液比、提取温度、提取时间和乙醇浓度对柿叶中总皂苷提取率的影响。 2.1 超声波辅助提取对柿叶总皂苷提取的影响 首先我们对超声波辅助提取进行单因素试验；在相同浸提时间、浸提温度和固液比，不同超声波辅助处理时间的条件下对柿叶总皂苷进行提取并过滤得出滤液（浸提时间为：18min，浸提温度为：80℃，固液比为：1：10）。将过滤取得的滤液以1：10的比例进行稀释，并将稀释后的溶液在OD580nm下测定其吸光值，最终的结果为： 表1：不同超声波辅助提取时间中柿叶总皂苷提取的吸光值 超声时间（min）0369121518吸光度（A）OD=580nm0.4670.5520.5570.6120.6520.5260.5070.4660.5510.5580.6100.6520.5270.5070.4660.5490.5580.6110.6530.5270.508均值（A）0.4660.5510.5580.6110.6520.5270.507 在浸提时间为：18min，浸提温度为：80℃，固液比为：1：10的固定条件下，超声波辅助处理所得，由表1可见用超声波辅助12min吸光值最大，浸提效果最好，超过此值后呈递减趋势，可能是超声波机械作用和空化作用提高的柿叶细胞皂苷浸出率，随着作用时间的延长其机械作用使部分皂苷的结构破坏而损失。我们得出的最终得出结论为