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第八章 微生物遗传
第一节 遗传的物质基础
1三个经典的实验
1928年 Griffith转化实验(动物实验)实验说明:加热杀死的SIII型细菌细胞内可能存在一种转化物质,它能通过某种方式进入RII型细胞并使RII型细胞获得稳定的遗传性状,转变为SIII型细胞。
1944年O.T.Avery、C.M.MacLeod和M。McCarty从热死S型S. pneumoniae中提纯了可能作为转化因子的各种成分,并在离体条件下进行了转化试验:
1952 噬菌体感染实验
第二节 微生物的基因组结构
基因:指DNA链上编码多肽、tRNA和rRNA的特定核苷酸序列。
基因组(genome):一个物种的单倍体的所有染色体及其所包含的遗传信息的总称
原核生物(如细菌)——多数为单倍体;
真核微生物——通常为双倍体;
(例如啤酒酵母有16条染色体,可以单倍体生活,也可以双倍体生活)
大肠杆菌啤酒酵母詹氏甲烷球菌类型原核微生物真核微生物古菌内含子无有无(有些菌有)操纵子有无有组蛋白无有有基因组重复序列有(少而短)高度重复,遗传丰余有其它双链环状DNA/
第三节 质粒和转座因子
质 粒 的 主 要 类 型
质粒:独立于染色体外能自主复制的细胞质遗传因子,通常有三种构型:CCC型、开环型(OC)、线型(L)
F质粒:与有性接合有关
R质粒:与抗药性有关
Col质粒:编码免疫蛋白
毒性质粒:苏云金芽孢杆菌内毒素质粒
代谢质粒:降解复杂有机化合物
隐秘质粒:酵母的2μm质粒
转座因子:细胞中能改变自身位置的一段DNA序列
插入序列(Insertion Sequence, IS)
转座子(Transposon, Tn)
Mu噬菌体
转座引起的遗传效应 插入突变
产生染色体畸变
基因的移动和重排
第四节 基因突变和修复
4.1突变类型 同义突变
表型变化
错义突变
无义突变
移码突变 营养缺陷型
抗性突变型
条件致死突变型
形态突变型
抗原突变型
产量突变型
4.2自发突变——分子基础:碱基的互变异构---转换和颠换
4.3诱发突变 碱基结构类似物
胸腺嘧啶类似物-----5-溴尿嘧啶
腺嘌呤类似物--------2-氨基嘌呤
插入染料
溴化乙锭、吖啶橙
诱变剂
亚硝酸、羟胺类化合物、烷化剂
辐射和热
紫外线-----嘧啶二聚体
生物诱变因子:转座因子
4.4 诱变剂与致癌物质——Ames实验
4.5 DNA损伤的修复
光复活作用:光复合酶直接修复
切除修复
重组修复
SOS修复
第五节 细菌的基因转移和重组
转化(transformation)
结合(conjugation,mating)
转导(transduction)
5.1 转化
定义:受体细胞直接吸收了来自供体细胞的DNA片断,并把它整合到自己的基因组中,细胞部分遗传性状发生变化的现象叫转化。
转化因子:转化是游离的DNA片断的转移和重组,游离的DNA片断叫转化因子。
感受态:受体细胞能接受转化的生理状态称为感受态,只有处于感受态的细菌才能接受转化因子。
特点: 不需两个细胞直接接触,供体DNA提取出来,注入受体即可
根据感受态建立方式,可以分为 自然转化:感受态的出现是细胞一定生长阶段的生理特性;
人工转化:人为诱导使细胞具有摄取DNA的能力;
核酸酶
细菌的染色体
DNA结合蛋白
感受态特异蛋白
自然转化
自由核苷酸
细菌生长到一定阶段,分泌出感受态因子,感受态因子与细胞表面受体相互作用,诱导一些感受态特异蛋白质表达,使细胞表面的DNA结合蛋白与核酸酶裸露出来,使其具有与DNA结合的活性,DNA以双链的形式在细胞表面结合并遭到酶切,核酸内切酶切断一条链,被切断的链遭到核酸酶降解,成为寡核苷酸释放到培养基中,另一条链与感受态特异蛋白结合,进入细胞,通过同源重组以置换的方式整合进受体染色体DNA,经复制和细胞分裂后形成重组体。
人工转化 高浓度钙离子诱导
电穿孔法
5.2 接合
定义:通过细胞与细胞的直接接触而产生的遗传信息的转移和重组过程。
发现过程:两株多重营养缺陷型菌株只有在混合培养后才能在基本培养基上长出原养型菌落,而未混合的两亲菌均不能在基本培养基上生长,说明发生了遗传交换和重组;
U型管试验→证明
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