王佩开题报告终稿.ppt

中华鳖IGF系统基因的克隆及序列分析;01;1;1、中华鳖的研究现状 目前，中华鳖的养殖方式主要有鱼鳖混养、池塘单养和工厂化养殖，中华鳖自20世纪90年代开始在中国广泛养殖，截至2011年，中华鳖年产量达25万多吨。目前，有关中华鳖的研究主要集中在营养、养殖、病害、形态、遗传多样性、性别分化等方面。 ; 由于长期盲目的苗种培育，导致目前中华鳖种质资源混杂，中华鳖的生长性能下降，因此，有关中华鳖的生长性能的报道多数集中在饲料营养、药物等研究上，而从基因角度提高中华鳖的生长性能，从而改变中华鳖选育工作方法的研究较少。张志允采用微卫星分子标记技术对中华鳖黄河群体F3世代选育，发现F3世代保持较高的遗传多样性，显示具有较大的选育潜力。李林春通过转入“全鱼”生长激素基因，提高了F0转基因中华鳖的生长速度。 ;2、IGF系统基因在水产动物中的研究现状 IGFs通过自分泌、旁分泌和内分泌的方式作用于靶器官,影响细胞的生长和分化,并抑制细胞凋亡，IGFs,尤其是IGFI，能够介导GH在体内完成生理功能。IGFI及IGFⅡ能诱导罗非鱼卵母细胞的成熟和颗粒细胞的增殖与分化。 此外，鱼类IGFⅡ还可能参与卵黄的生成,以供胚胎后期发育使用。; 鱼类 IGF-Ⅰ的研究，自 1989 年银大麻哈鱼 IGF-ⅠcDNA 的首次克隆，人们已从罗非鱼、斑马鱼中分离了 IGF-Ⅰ基因。近几年的研究表明，IGF还能刺激或抑制一些激素的释放。有报道IGF-I在体外会抑制杂交条纹鲈鱼和大比目鱼垂体释放GH。同时，研究发现，和抑制GH释放不同，IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ会刺激罗非鱼垂体释放促乳素(prolactin，PRL)，但并不改变PRL mRNA含量，说明IGF是在转录后水平调节PRL的。;3、候选基因的研究 相对传统育种方法，基因候选法在动物育种工作中的应用有多态位点选择简单、统计检验效率高、应用范围广、总费用低，易于实施、操作简单等优点。目前，在牛、羊、猪等家禽育种工作中开始应用。有学者通过对IGF-I、IGF-Ⅱ及IGF-ⅡR这三个候选基因的多态性进行研究,并分析了IGF-I的微卫星多态可能对山羊的产羔数的影响。 ; IGF-I作为机体生长、发育和代谢的一个重要调控因子，??时也是生长激素(GH)启动生长活性的主要介导者。其对动物胚胎期的发育及其出生后的生长都起着重要作用。国外学者研究发现，IGF-Ⅱ基因是影响肌肉发育表达的主要候选基因，IGF-Ⅱ与机体的生长发育相关，IGF-Ⅱ的缺乏或者过度表达都会导致机体发生相应的变化。;研究的意义; 目的; 活体解剖得到肌肉、肝脏等组织，液氮速冻，置于-80℃冰箱保存备用。NCBI查找近缘物种基因序列设计简并引物，扩增获得基因部分片段序列，设计引物进行3’及5’端扩增，PCR产物进行电泳检测、测序、生物信息学分析。;实验预期结果;