人参皂甙Rg1促进嗅鞘细胞迁移和修复脊髓损伤的实验研究.pdfVIP

人参皂甙 Rg1 提高嗅鞘细胞生物学活性及其机制研究 中文摘要 人参皂甙Rg1促进嗅鞘细胞迁移及修复脊髓损伤的实验研 究 中文摘要 第一部分：人参皂甙 Rg1 对嗅鞘细胞迁移能力的影响 目的：探讨人参皂甙 Rg1 对嗅鞘细胞（OECs）迁移能力及迁移相关因子基质金 属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及神经细胞黏附分子 1（NCAM1） 表达的影响。 方法：从新生 3~5d 的 SD 大鼠嗅球取材获得嗅鞘细胞体外培养、纯化后，进行 人参皂甙 Rg1 干预（40 μg/ml 浓度下干预 72 h）并设置对照（加等量 DMEM/F12 培 养基），通过划痕实验和 Transwell 小室实验检测人参皂甙 Rg1 对嗅鞘细胞迁移能力 的影响。反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分别测定两组细胞迁移相关因子 MMP-2、 MMP-9 和 NCAM1 的 mRNA 表达。通过 Western-blot 研究 Rg1 对嗅鞘细胞 PI3K/Akt 通路的影响。 结果：Rg1 组划痕愈合面积明显高于对照组(P0.05)； Rg1 组嗅鞘细胞穿过隔离 膜的细胞数量较对照组明显增多(P0.05)；RT-PCR 结果表明：人参皂甙 Rg1 显著上 调嗅鞘细胞 MMP-2、MMP-9 和 NCAM1 的 mRNA 表达(P0.05)。Rg1 能够促进嗅鞘 细胞 PI3K/Akt 通路的活化。 结论：人参皂甙 Rg1 通过上调嗅鞘细胞迁移相关因子 MMP-2、MMP-9 和 NCAM1 的表达，提高细胞的迁移能力，这一作用可能通过 PI3K/Akt 通路完成。 关键词：嗅鞘细胞；人参皂甙 Rg1；迁移；基质金属蛋白酶；神经细胞黏附分子 I 中文摘要 人参皂甙 Rg1 提高嗅鞘细胞生物学活性及其机制研究 第二部分：人参皂甙 Rg1 促进嗅鞘细胞修复脊髓损伤的实验研究 目的：研究人参皂甙 Rg1 对嗅鞘细胞（olfactory ensheathing cells, OECs）移植修 复脊髓损伤能力的影响。 方法：新生 SD 大鼠嗅球组织体外培养、纯化嗅鞘细胞，人参皂甙 Rg1 干预并设 置对照，Allen 打击建立大鼠脊髓损伤模型，随机分成三组，对照组（control）、嗅 鞘细胞移植组（OECs 组）和 Rg1 干预嗅鞘细胞移植组（Rg1+OECs 组），于移植后 第 1、3、7、14、28 天分别进行肢体活动 BBB 评分，并于第 28d 取损伤部位脊髓组 织制作石蜡切片进行免疫组化检测；RT-PCR 分别测定 OECs 组和 Rg1+OECs 组脊髓 组织中 CNTF 和 VEGF 的 mRNA 表达。 结果：Rg1+OECs 组后肢运动恢复情况优于 OECs 组和对照组，组织切片示 Rg1+OECs 组神经元数量明显高于 OECs 组和对照组（P0.01），GFAP 表达量显著 低于 OECs 组和对照组（P0.01），HE 染色示 Rg1+OECs 组脊髓组织结构清晰，囊 性病变及细胞水肿坏死数量明显少于其它各组；RT-PCR