食品微生物检验染色法资料.pptVIP

四 食品微生物检验染色法 微生物中细菌、致病菌是很小的生物体，必须通过染色的方法，在显微镜下才能看得清楚，并且还可以通过染色的方法鉴别革兰氏染色特性，以及是否长有鞭毛、周毛、荚膜和芽孢等。 ;1、美蓝染色法 （一）吕氏碱性美蓝染色液 美蓝 0.3g 95%乙醇 30ml 0.01%氢氧化钾溶液 100ml 将美蓝溶解于乙醇中，然后于氢氧化钾溶液混合 （二）染色法 将涂片在火焰上固定，待冷却后滴加染液，染 1min~3min，水洗，待干，镜检。 （三）结果 菌体呈蓝色 ;2、革兰氏染色法 （一）染色液 a、结晶紫染色液 结晶紫 1g 95%乙醇 20ml 1%草酸铵水溶液 80ml 将结晶紫溶解于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。 b、革兰氏碘液 碘 1g 碘化钾 2g 蒸馏水 300ml 将碘与碘化钾先进行混合，加入蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后，在加蒸馏水至300ml。 ;c、沙黄复染法 沙黄 0.25g 95%乙醇 10ml 蒸馏水 90ml 将沙黄溶解于乙醇中，然后用蒸馏水稀释。 （二）染色法 a、将涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染色液，染1min，水洗。 b、滴加革兰氏碘液，作用1min，水洗。 ;c、滴加95%乙醇脱色，约30s；或将乙醇滴满整个涂片，立即倾去，再用乙醇滴满整个涂片，脱色10s。 d、水洗，滴加复染液，复染1min，水洗，待干，镜检。 （三）结果 革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。 注：亦可用1：10稀释石炭酸复红染色液作复染液， 复染时间仅需10s。 ;3、耐酸性染色法（萎—倪二氏法） （一）染色液 a、石炭酸品红染色液 碱性品红 0.3g 95%乙醇 10ml 5%苯酚水溶液 90ml 将品红溶解于乙醇中，然后与苯酚溶液混合。 b、3%盐酸-乙醇 浓烟酸 3ml 95%乙醇 97ml c、复染液 吕氏碱性美蓝染色液 ;（二）染色法 a、将涂片在火焰上固定，滴加石炭酸品红染色液，徐徐加热至有蒸汽出现，但切不可使沸腾。染液因蒸发减少时，应随时添加。染5min，倾去染液，水洗。 b、滴加盐酸-乙醇脱色，直至无红色脱落为止，（所需时间视涂片厚薄而定，一般为1min~3min），水洗。 c、加吕氏碱性美蓝染色液，复染30s~1min，水洗，待干，镜检。 （三）结果 耐酸性细菌呈红色，其他细菌、细胞等物质呈蓝色。 ;;5、奥尔特氏荚膜染色法 （一）染色液 沙黄 3g 蒸馏水 100ml 用乳钵研磨溶解 （二）染色法 将涂片在火焰上固定，滴加染色液，并加热至产生蒸汽后，继续染3min，水洗，待干，镜检。 （三）结果 炭疽芽孢杆菌菌体呈赤褐色，荚膜呈黄色。 ;6、瑞氏染色法 （一）染色液 瑞氏色素 0.1g 甲醇 60ml 用乳钵研磨溶解 （二）染色法 a、待涂片自然干燥后，滴加染色液，固定1min。 b、加入等量蒸馏水（pH6.5），染色3min~5min。 c、用蒸馏水冲洗，待干，镜检。 ;7、鞭毛染色法 （一）染色液的配制 a、甲液 称丹宁酸5g、氯化高铁（FeCl3）1.5g，溶于100ml蒸馏水中，待溶解后加入1%的氢氧化纳溶液1ml和15%的甲醛溶液2ml。 b、乙液 称2g硝酸银溶于