2009第4次课.pptVIP

第三章 消毒灭菌与病原微生物实验室 生物安全;;;消毒(disinfection) ： The reduction or elimination of pathogenic microorganisms in or on materials, so they are no longer a health hazard.杀死物体上病原微生物的方法,称为消毒。(不一定能杀死含芽胞的细菌和非病原微生物);概念：;无菌(asepsis) ：No living microorganisms exists. 无菌操作(antiseptic technique)：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。;Section 2 Method for Controlling Microorganisms 第二节?? 消毒灭菌的方法 物理消毒灭菌法Controlling microorganisms by physical agents 化学消毒灭菌法Using Disinfectants and Antiseptics to Control Microorganisms ;一.物理消毒灭菌法Controlling microorganisms by physical agents 主要有:热力、辐射、滤过、干燥与低温等。 (一)热力灭菌法 High Temperature 无芽胞细菌经55℃-60℃作用30-60分钟死亡;湿热80℃经5-6分钟可杀灭所有细菌繁殖体、真菌和酵母菌。 干热灭菌法 Dry heat 湿热灭菌法 Moist heat ;1.干热灭菌法dry heat sterilization A.原理:脱水干燥和大分子变性。 B.方法: ⑴焚烧：废弃物、尸体; ⑵烧灼:接种环和试管口的灭菌; ⑶干烤:烤箱灭菌; 171℃,1h; 160℃,2h; 121℃,16h 适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品,例玻璃器皿、瓷器、玻璃注射器等的灭菌。 ⑷红外线：0.7-1000μm电磁波，1-10 μm热效应强；照射表面灭菌，不能使物体均匀加热，医疗器械灭菌 ;2.湿热灭菌法moist heat sterilization A．巴氏消毒法(pasteurization)：法国巴斯德创用 ⑴61.1-62.8℃，30分钟； ⑵71.7℃15-30秒 主要用于牛乳消毒。 B.煮沸法: 2%碳酸氢钠 食具、刀剪、镊子等 C.流动蒸气灭菌法:又称常压蒸气灭菌法 D.间歇蒸气灭菌法:Arnold(阿诺氏灭菌器) 此法用于不耐高热的含糖、牛奶等培养基的消毒。 E.高压蒸气灭菌法（autoclaving）:最有效的一种灭菌方法 1.05kg/cm2(15磅) 、121.3℃，15-20分钟。用于一般培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温耐湿等物品的灭菌。;高压蒸汽灭菌器;※湿热灭菌的效力比干热灭菌的大,原因: ⑴湿热中细菌菌体蛋白较易凝固; ⑵穿透力比干热大; ⑶湿热的蒸气有潜热存在。 ;（二）辐射杀菌法Radiation sterilization ;（三） 滤过除菌法 Filtration sterilization ;滤器和层流室;（四） 干燥与低温抑菌法 dry and low temperature bacteriostasis ; 常用消毒剂的杀菌机制sterilizing mechanism of chemical disinfectants 1、使菌体蛋白变性或凝固：例酚类(高浓度)醇类等； 2、干扰微生物酶系统和影响其代谢:例重金属与细菌的-SH基结合使有关酶失去活性； 3、损伤细胞膜：例表面活性剂和脂溶剂（新洁尔灭等）。 选择原则 效果好（适时适量适度）、毒力低、便宜;（一）高效消毒剂（high-level disinfectants）杀芽胞 1.含氯消毒剂；2.过氧化物消毒剂； 3.醛类消毒剂；4.环氧乙烷 （二）中效消毒剂（intermediate-level disinfectants）杀繁殖体 1.含碘消毒剂；2.醇类消毒剂 （三）低效消毒剂（low-level disinfectants）杀多数繁殖体 1.季铵盐类；2.氯已定；3.高锰酸钾 ;第三节 消毒灭菌的运用;(二)室内空气消毒灭菌 1、物理消毒法