盐酸戊乙奎醚对新生大鼠内毒素血症时肠组织HIF1α表达影响.pdf

摘要盐酸戊乙奎醚对新生大鼠内毒素血症时肠组织???表达的影响研究生赵军博导师姜丽华郑州大学第三附属医院麻醉科新生儿肠损伤是儿科常见的疾病之一，其发生的主要原因有早产、窒息引起的缺血缺氧以及感染等。其中严重感染常可导致危重患儿胃肠功能衰竭。肠道在全身炎症反应综合征???和多器官功能障碍综合征???的发生发展过程中扮演着极其重要的角色。肠道感染或缺血缺氧会导致肠黏膜屏障功能受损，引起细菌及内毒素的移位，引发败血症和脓毒性休克，从而进一步加重肠组织的损伤，甚者可伴随远隔器官受累。脂多糖???魑5湫偷哪诙舅兀??诱发内毒素血症，导致肠黏膜损害。国内外诸多研究发现缺氧诱导因子????一??在内毒素性肠损伤的病理改变过程中具有重要作用。有研究指出肠道缺血缺氧可以诱导肠黏膜????中?弑泶铮?庖唤峁?辽僭诓糠殖潭壬鲜?由于肠道细菌的移位及其产物?鏛??脑黾铀?斐傻摹??．??灸芄煌ü??活其下游的相关基因转录并促进炎症因子的大量释放和引起细胞凋亡等，从而加重内毒素血症或缺血／再灌注时的组织损伤。盐酸戊乙奎醚???俏夜??主研制的抗胆碱药。研究表明，盐酸戊乙奎醚因能改善微循环、降低毛细血管壁通透性和减少溶酶体释放而具有多器官保护作用。目前盐酸戊乙奎醚对内毒素性肺损伤的保护作用得到了广泛地证实和认可，我们通过大量的临床观察发现盐酸戊乙奎醚在解除肠痉挛、减轻肠道水肿方面同样具有良好的效果。基于以上背景，本课题旨在研究内毒素致新生大鼠肠损伤时盐酸戊乙奎醚预先给药对肠组织????颈泶锏挠跋欤?⒍云涑Ρ；ぷ饔没?平?谐醪教教帧? 的材料与方法目探讨盐酸戊乙奎醚预先给药对内毒素致新生大鼠肠损伤时肠组织?????芯慷韵???笛榉椒?内毒素致肠损伤模型组腹腔注射内毒素?妇??嗵荓?，?甤??理盐水??瓜?５谝徊糠质笛橛诟骨蛔⑸淠诙舅鼗蛏?硌嗡???樽聿⒔馄?和其他相关细胞因子表达的影响及其发挥肠保护作用的可能机制，为临床防治新生儿肠损伤提供一条新的思路。?只??督】敌律?日龄?大鼠，由郑州大学???南省实验动物中心提供，雌雄不限，体重?±?。??实验动物分组本实验分为两部分。第一部分：将?只幼鼠随机分为?椋?孔??弧?分别为生理盐水对照组?组?⒛诙舅刂鲁λ鹕四Ｐ妥???和盐酸戊乙奎醚干预组?组?１静糠质笛橹饕=?谐ψ橹?#?芍乇鹊牟舛ā⒊ψ橹疕?染色后光镜下形态学改变的观察以及相关细胞因子的检测。第二部分：同样将另?只健康新生?樟銼?笫笏婊?治狢组、?楹蚉组，每组?只。本部分实验用于观察造模后各组幼鼠行为活动的改变并计算每组???媛省???动物模型的制备????荆?拦???駁，配制浓度为???／?；盐酸戊乙奎醚干预组在注射内毒素前????雀骨蛔⑸溲嗡嵛煲铱??成都力思特制药股份有限公司，批号：?????／?，配制浓度为???∥?；生理盐水对照组腹腔注射生幼鼠。两部分实验均在造模完成后将幼鼠放回鼠笼与母鼠共同喂养。??肠组织的标本采集在密闭玻璃容器中吸入七氟烷快速麻醉幼鼠后，将其固定于操作台，解剖，用??⑸淦餮杆俳?行脑嗖裳#?仓?小时，?嫦???／??胄??种樱?取上清液，．?℃冰箱中保存待检。距回盲部??蛏先』爻ψ橹??，?嫔?理盐水冲洗肠管?椋?酥轿?沙ψ橹?砻嫠?趾螅???回肠组织分为?危?上段???用于光镜下形态学观察，中上段??糜诓饬砍ψ橹?V睾透芍兀??摘要??築????? 下段??糜谥票赋ψ橹?冉?舛ㄏ喙叵赴?蜃拥谋泶铮?露?锄用于?—??将上段?幕爻ψ橹?湃?％多聚甲醛中保存待检。石蜡包埋后制作?????ú舛ǔψ橹疕???将下段?净爻ψ橹?璂???寰缓舐酥轿?桑??旱Q杆倮淙春蠓湃?结果??．?扑愠ψ橹?#?芍乇??????ú舛ǔψ橹?蠺??椤???、???颉?抽、二胺氧化酶?????臣蒲Т????—?，以铲???煅樗?迹?碢?．?时，组问差异有统计学意义。检测肠组织??????的表达。??检测指标电子称重计称量中上段??爻ψ橹?⒓锹际V兀?婧蠓湃??婧阄潞娓?箱烘干??林亓坎辉俜⑸?浠??饬扛芍兀?扑闶#?芍乇取???．?ψ橹?翁?Ч鄄?病理切片，行?染色。??豆饩迪鹿鄄旎爻ψ橹?つど掀は赴?翁?У母谋洹?及血清??暮??中下段??爻ψ橹?浦睾笾票缸橹?冉??℃下???痬?离心?分钟，取上清液，置于．?℃冰箱中保存待检。???弧???、??????和???检测严格按照???约梁????荆?拦?说明书进行。??的表达冻存管中，置于．?℃冰箱保存待检。经肠组织总??奶崛　⒛孀B肌??扩增和琼脂糖凝胶电泳等步骤检测幼鼠肠组织???位??的表达情况。采用???．?臣迫砑???型臣蒲Х治觯?屏孔柿弦跃??辣曜疾????表示，多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用最小显著差异法??庋酃鄄欤?骨蛔⑸銵?后，?∈蹦贚组与?橛资罂J汲鱿只肷矶?动，呼吸急