2.1微生物的培养要点.ppt

例1、下列物质可作为培养硝化细菌碳源、氮源和能源的依次是?? （??? ） A含碳无机物、氨、氨??B含碳无机物、氮、硝酸盐 C含碳有机物、氨、光??D含碳有机物、硝酸盐、氨 例2 、要将土壤中的自生固氮菌（如原褐固氮菌）与其它细菌分离出来，应将它们接种到（?? ） A．加入指示剂的鉴别培养基 B．含有蛋白胨的固体培养基 C．没有有机氮的选择培养基 D．营养要素全面的液体培养基 思考1 ①溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热 ②加琼脂的目的是什么? 思考2 ①在灭菌前, 用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是什么？ ②培养皿能否用高压蒸汽灭菌？ * 到目前为止， 几十项Nobel生理学和医学奖，化学奖 都与微生物学有关 微生物的类群 原生生物 原核生物 真菌 病毒 如酵母菌 单细胞的动植物 如草履虫、单细胞藻类等 微生物包含了除植物界和动物界以外的所有生物 无细胞结构 真核细胞 细菌、蓝藻 原核细胞 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养 微生物的实验室培养条件： （1）为培养的微生物提供合适的营养和环境条件 （2）确保其他微生物无法混入 研究和应用微生物的前提 防止杂菌入侵，获得纯净的培养物 一.培养基 1．概念：人们按照微生物对 的不同需求，配制出的供其 的营养基质。 （1）按物理性质来分：培养基可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。 （2）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。 （3）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。 2.分类： 营养物质 生长繁殖 微生物需要的四大类营养要素物质是： 3.培养基的构成 1.碳源 2.氮源 3.无机盐 4.水 凡是能为微生物提供所需碳元素的营养物质。 ①无机碳源：CO2；NaHCO3等 ②有机碳源：糖类、脂肪酸、蛋白质、花生粉饼、石油等 ⑴概念 ⑵来源： ⑶不同微生物所利用的碳源不同： 1.微生物的碳源 异养型微生物的碳源为：含碳有机物（有机碳） 自养型微生物的碳源为：含碳无机物（无机碳） ①无机氮源：N2、铵盐、硝酸盐、NH3等 ②有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等 凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。 2.微生物的氮源 ⑴概念： ⑵来源： ⑶固氮微生物所利用的氮源是： 3.特殊要求 培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子 微生物生长不可缺少的微量有机物）如维生素、某些氨基酸、碱基 以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。 氮气 练一练 牛肉膏当中含有肌酸、肌酸酐、多肽类、氨基酸类、核苷酸类、有机酸类、矿物质类及维生素类。的水溶性物质。 牛肉膏为微生物提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素. 蛋白胨主要提供氮源和维生素。 加入青霉素的培养基: 不加氮源的无氮培养基: 不加含碳有机物的无碳培养基: 加入高浓度食盐的培养基: 几种选择培养基举例： 分离酵母菌、霉菌等真菌 分离固氮菌 分离自养型微生物 加入唯一碳源为纤维素的培养基 分解纤维素的细菌 分离金黄色葡萄球菌 几种菌落及其形态 几种菌落及其形态 1.无菌范围： ①实验操作空间,操作者的手、衣着消毒. ②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行. ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触. 超净工作台 二.无菌技术： 防止外来杂菌的污染 耐高温需保持干燥的 物品，160～170℃ 1～2小时 接种环、接种针等 金属用具 70~75℃、30min 80℃、15min 100℃、5~6min 消毒 灭菌 定义 方法 较为温和理化方法， 杀死部分微生物 （不包括芽孢、孢子） 强烈的理化因素， 杀死所有微生物 （包括芽孢、孢子） 煮沸消毒法 巴氏消毒法 化学药剂 紫外线 灼烧灭菌 干热灭菌 酒精、氯气、石炭酸或煤酚皂溶液等 高压蒸汽灭菌 培养基， 100KPa、 121℃、15～30min 2.消毒与灭菌： 灼烧灭菌 干热灭菌箱 高压蒸汽灭菌锅 煮沸消毒法 巴氏消毒法 化学药剂（70%酒精等） 紫外线 针对不耐高温的液体 接种室、超净工作台 能耐高温的，需要保持干燥的物品 灼烧法 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 接种工具（接种环等） 吸管 实验操作者的双手 培养基 1、消毒方法 2、灭菌方法 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手 答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。 1000ml牛肉膏蛋白