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第 十 四 章
RNA的生物合成
DNA
复制
转录
蛋白质
翻译
中心法则
重点
RNA
转录 (transcription)
转录是在 DNA的指导下的RNA聚合酶的催化下,按照硷基配对的原则,以四种核苷酸为原料合成一条与模板DNA互补的RNA 的过程。RNA的转录从DNA模板的特定位点开始,并在一定的位点终止。此转录区域为一个转录单位。
转录
DNA
复制和转录的区别
参与转录的物质
原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP)
模板: DNA
酶 : RNA聚合酶(RNA polymerase, RNA-pol)
其他蛋白质因子
模板和酶
Templates Enzymes
第一节
一、转录模板
DNA分子上转录出RNA的区段,称为结构基因(structural gene)。
DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链,称为模板链(template strand),也称作反意义链。相对的另一股单链是编码链(coding strand),也称为有意义链。
5′···GCAGTACATGTC ···3′
3′··· c g t g a t g t a c a g ···5′
5′···GCAGUACAUGUC ···3′
N······Ala · Val · His · Val ······C
编码链
模板链
mRNA
蛋白质
转录
翻译
不对称转录(asymmetric transcription)
在DNA分子双链上某一区段,一股链用作模板指引转录,另一股链不转录 ;
模板链并非永远在同一条单链上。
5?
3?
3?
5?
模板链
编码链
编码链
模板链
结构基因
二、RNA聚合酶
(一)原核生物的RNA聚合酶
核心酶 (core enzyme)
全酶 (holoenzyme)
RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合
(二)真核生物的RNA聚合酶
三、模板上酶的辨认、结合
原核生物一个转录区段可视为一个转录单位,称为操纵子(operon),包括若干个结构基因及其上游(upstream)的调控序列。
RNA聚合酶结合模板DNA的部位,称为启动子(promoter)。
RNA聚合酶保护法
启动子的确定
开始转录
T T G A C A
A A C T G T
-35 区
(Pribnow box)
T A T A A T Pu A T A T T A Py
-10 区
原核生物启动子保守序列
RNA-pol辨认位点
(recognition site)
转录过程
The Process of Transcription
第二节
(一)转录起始
转录起始需解决两个问题:
RNA聚合酶必须准确地结合在转录模板的起始区域。
DNA双链解开,使其中的一条链作为转录的模板。
一、原核生物的转录过程
2. DNA双链解开
1. RNA聚合酶全酶(?2????)与模板结合
3. 在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应,形成转录起始复合物
RNApol (?2????) - DNA - pppGpN- OH 3?
转录起始复合物:
5?-pppG -OH + NTP ? 5?-pppGpN - OH 3? + ppi
转录起始过程
(二)转录延长
1. ?亚基脱落,RNA–pol聚合酶核心酶变构,与模板结合松弛,沿着DNA模板前移;
2. 在核心酶作用下,NTP不断聚合,RNA链不断延长。
(NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi
转录空泡(transcription bubble):
RNA-pol (核心酶) ···· DNA ···· RNA
5?
3?
DNA
原核生物转录过程中的羽毛状现象
核糖体
RNA
RNA聚合酶
依赖Rho (ρ)因子的转录终止
非依赖Rho因子的转录终止
(三)转录终止
指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进,转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。
分类:
A T P
1. 依赖 Rho因子的转录终止
2. 非依赖 Rho因子的转录终止
DNA模板上靠近终止处,有些特殊的碱基序列,转录出RNA后,RNA产物形成特殊的结构来终止转录。
5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3`
5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3`
RNA
5?TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATG
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