东北制药辽宁生物生物分子诊断试剂培训材料要点.ppt

分子检测产品简介 东北制药集团辽宁生物医药有限公司建于2010年2月，是由东北制药集团与国外 先进技术团队共同创办的高科技合资企业。 公司以重大传染病分子诊断试剂作为先导产品，陆续推出其他系列分子诊断试剂，同时开展保健品和基因工程药物等产品的研发和生产。 公司位于辽宁本溪经济开发区医药产业园，项目计划投资2.52亿元，分两期建设 完成。设有符合GMP要求的生产车间，研发中心和质检中心。 公司有6个分子诊断试剂产品投入生产，可以年产3000万人份诊断试剂。 公司积极引进国内外高技术人才，不断提升研发能力和生产技术水平，在生物 医药领域为客户提供高品质产品和优质服务，是国内一流的临床诊断试剂和生物 医药产品的生产和供应商。 公司简介 技术平台建立 分子精确检测技术平台 公司引进国外原创技术，创建了分子精确检测技术平台，开发了系列重大传染病病原体（如乙肝，丙肝和艾滋病病毒等）荧光定量检测试剂。其检测灵敏度，精确性和稳定性达到国际同类产品的先进水平，同时检测程序简单，容易操作，更具有产品优势。 纳米磁珠核酸提取技术 平台介绍 东药生物 磁珠核酸提取基本原理 第一步：细胞的裂解， 释放核酸 第二步：磁珠选择性的与核酸结合 第三步：用洗涤液将杂质清洗。 第四步：用洗脱液将核酸洗脱下来。 东药生物 东药生物 东药生物磁珠法介绍 全分散高科技纳米磁珠（显微照片） 东药生物磁珠样品 磁珠分离器 东药生物磁珠核酸纯化过程 1.常温裂解 2.磁珠吸附 3.一次清洗 4.磁珠吸附 5.常温洗脱 6.转移核酸 东药生物 常规磁珠核酸纯化基本过程 东药生物 1.加入裂解液 2.高温裂解病毒 3.磁珠吸附 4.一次清洗 9.磁珠吸附 10.洗脱核酸 11.高温助洗脱 12.转移核酸 5.磁珠吸附 6.二次清洗 7.磁珠吸附 8.三次清洗 国内现有试剂操作过程 东药生物磁珠核酸纯化平台技术优势 比较项目 东药生物 常规磁珠法 备 注 酶促裂解 不需要 需要 简化操作，降低成本，节省时间。 裂解温度 室温 55-65℃ 加热增大交叉污染概率，同时导致核酸降解，降低了检测灵敏度。 洗 涤 1次完成 洗涤 3-4次 简化操作，提高操作效率，减少污染。 核酸洗脱 无需加热 加热洗脱 简化操作，降低交叉污染概率。 更换离心管 无需更换 更换2-3次 简化操作，降低成本，减少污染 核酸回收率 高 低 操作过程少，无热损耗，核酸损失率低 核酸纯度 高 低 灵敏度好，重复性好 耗时 20-30分钟 40-60分钟 24个样本 东药生物 东药生物 内对照分子监测系统介绍 内对照系统的重要性 1. 真实反应扩增效率避免假阴性，假阴性是目前PCR方法诊断试剂体系中最重视的问题之一，是检测结果可靠性的重要标示。 2. 内对照能够对整个实验流程，包括样品提取、分装、PCR热循环仪孔间差、PCR抑制元素等等可能的影响因素进行监控，能够提高检测系统的安全性。 东药生物 内对照系统监控流程 东药生物 1.内标监控核酸提取全程 2.内标监控PCR扩增全程 3.内标监控PCR仪器孔间差异 东药生物 内对照系统有效性的比较 比较项目 某公司 罗氏公司 东药生物 是否能够监测核酸提取过程？ 能 能 能 是否能够监测PCR抑制物质？ 部分能 能 能 是否能监测PCR扩增空间差异？ 部分能 能 能 是否对靶基因扩增产生抑制效应？ 是 否 否 是否干扰灵敏度？ 是 否 否 是否对95%以上的阳性样本起到监测作用？ 否 是 是 最终判断结果 失败 成功 成功 与罗氏试剂等效性判断 严重偏差 —— 等效 目前，东药生物建立的内对照系统，是国内唯一一个能够真正对样本检测全程起到质控作用的高效系统，达到美国罗氏试剂的同级水平。 东药生物 RNA 假病毒（Armored RNA） 质控系统介绍 RNA假病毒的重要性 东药生物 　 由于裸露的RNA标准品和质控品极不稳定。而使用病原体颗粒或细胞作为标准品和质控品，则有传染的危险性。因此美国罗氏公司开发了耐核糖核酸酶病毒样颗粒-MS2噬菌体样颗粒，又称RNA假病毒颗粒，解决了上述RNA标准品和质控品的长期储存的问题。本公司借鉴罗氏公司